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医学课件生物中心主要项目
生物中心主要项目 吕成伟 南方医院生物治疗中心 应用项目 CIK (Cytokine induced killer) TIL (Tumor infiltrating lymphocytes) DC/CTL (Dendritic cell / Cytotoxic T lymphcytes) 放免靶向治疗(131I -McAb ) 肿瘤标志物 CIK 1976年Morgan等发现小鼠脾细胞培养上清能刺激胸腺细胞生长的T细胞生长因子;1979年统一命名为IL-2。 1980年发现IL-2 能诱导自身LAK。 1983年Taniguchi等从Jurkat白血病细胞成功克隆人IL-2的cDNA,基因工程IL-2问世,推动了基础和临床应用。 肿瘤、免疫缺陷、感染等 CIK IL-2主要由T细胞或T细胞系产生: (1)CD4或CD8 T细胞: 丝裂原 CD4或CD8 同种异体Ag CD4 (PBMC、脾脏、淋巴结和扁桃腺T细胞) (2)T细胞肿瘤细胞系或白血病细胞系 (3)T淋巴细胞杂交瘤 CIK IL-2生物学作用: (1)CD4及CD8细胞都是IL-2作用靶细胞 (2)促进杀伤细胞分化和效应功能: 诱导CTL、NK、LAK等分化和效应功能 诱导杀伤细胞产生IFN-γ、TNF-α等 增强CTL穿孔素基因表达 (3)直接或间接作用B细胞 (4)活化巨噬细胞: 促进Mφ 通过ADCC杀伤肿瘤 CIK 1980年NIH癌症研究所Rosenberg等首先发现LAK细胞(lymphokine activated killer cell): 1. 纤维肉瘤C57BL/6小鼠脾细胞+ IL-2 纤维肉瘤细胞(自身正常细胞-) 2. PBL + IL-2 自体或同种异体瘤细胞(MHC 非限制性) 3. LAK存在于大颗粒淋巴细胞(large granular lymphocytes,LGL)中,不同于T、B细胞和单核细胞 CIK 多种细胞因子均可增强LAK活性: GM-CSF、TNF、IL-1、3、5、6 IFN-γ显著增强LAK活性 Anti-CD3 McAb联合IL-2不仅能比单用IL-2更显著增加LAK数量也使单个和总体LAK细胞活性显著增加。(100~400倍/6~20倍) CIK LAK体外长期培养:(临床) 3~5天 2~3周 数量100~1000倍 联合PHA或ConA 数量比单用IL-2高5~10倍。初始培养48小时内加入10ng/ml Anti-CD3扩增更明显,21天达1000倍。加入IFN-γ单个LAK细胞抗瘤活性提高几十倍。 LAK CIK (Cytokine induced killer) CIK CIK的杀瘤机制 直接杀瘤: 识别结合相 效靶复合体 杀伤相 细胞毒颗粒;穿孔素;Ca++ 裂解相 间接杀瘤: IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-1α等的细胞毒/抑制作用;相互诱生、协同增强NK、Mφ杀伤肿瘤细胞。 CIK 只有联合应用IL-2/LAK细胞才具有显著的体内抗肿瘤作用。 1984年11月,FDA批准NCI进行临床试验。 1985年Rosenberg等首次报道联合IL-2/LAK细胞治疗25例各种常规疗法治疗无效的晚期肿瘤患者的临床疗效。 IL-2/LAK细胞引起世人瞩目,并在基础和临床得到推广和改进。 肾细胞癌、黑色素瘤、结直肠癌、非何杰金氏淋巴瘤等疗效显著。 TIL 1986年发现经IL-2诱导的TIL体内抗瘤效果强于LAK 50~100倍;并可减少IL-2用量及副作用。 肿瘤间质,T淋巴细胞,CD8为主,非活化,拌用少量IL-2即可发挥明显抗瘤效果,副作用轻。 新TIL中T细胞对PHA呈低增殖反应,少分泌IL-2、IFN-γ等。 Anti-CD3 McAb联合IL-2不仅能比单用IL-2更显著增加
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