重组蛋白药物一般生产工艺与质量控制要点PPT.pptVIP

重组蛋白药物质控要点 原液：分子量检测 分子量是蛋白质理化性质之一。一般采用还原型SDS法测定，蛋白质在SDS和B-巯基乙醇存在下沸水浴5min，形成表面带大量负电荷的杆状分子，降低了分子形态和电荷的影响，在电泳过程中蛋白迁移率基本只与其分子量相关，目前广泛用于蛋白分子量的测定。该法具有简便，快速，直观等特点，目前作为基因工程药物原液检定的常规方法。该法可将蛋白质按分子量大小进行分离，因此，可用于蛋白质纯度分析，同时还能对聚合体进行分析。 * 重组蛋白药物质控要点 原液：紫外光谱扫描检测 这是基因工程药物的一个重要物理常数，对于一个蛋白质来说，它的最大吸收波长是固定的。对某一重组蛋白质来说，其最大吸收波长是固定的；在生产过程中每批产品的紫外吸收光谱应当是一致的。测定时以生理盐水为对照，在200～350 nm范围内对待检样品溶液进行扫描，每批制品紫外吸收图谱应与对照品一致且在280nm附近最大吸收波长应与理论值相符。 * 重组蛋白药物质控要点 原液：肽图检测 肽图分析是DNA产品质控的重要手段之一。通过肽图分析，可从一级结构研究重组产品与天然品的同质性。重组产品与天然产品具有相同的指纹图谱，它们具有相同的一级结构。进一步验证了它们的同质性。 大多基因工程产品都将肽图分析作为控制其一致性的重要常规指标之一，而采用的方法中．又以HPLC肽图分析最为多见。肽图谱对每一种蛋白质来说