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- 2018-06-07 发布于江苏
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食品微生物实验技术--实验二 细菌革兰氏染色法及细菌形态和特殊结构特征PPT
实验二 细菌革兰氏染色法及细菌形态和特殊结构特征;一、目的要求
掌握革兰氏染色的技术,了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类学上的意义。掌握芽孢、荚膜和鞭毛染色技术,了解芽孢、荚膜和鞭毛染色的原理。
二、基本原理
革兰氏染色法是一种鉴别性的染色方法,基本步骤为;先用初染剂结晶紫进行染色,再用碘液媒染,然后用乙醇(或丙酮)脱色,最后用复染剂(如番红)复染。结果细胞保留初染剂篮紫色的细菌为革兰氏阳性菌;如果细胞为复染剂的颜色(红色),则为革兰氏阴性菌。其机理是由于细菌细胞壁的化学组成及结构不同和通透性不同的缘故。
细菌的革兰氏染色受菌龄、培养基pH值和染色技术等因素的影响,并非固定不变。
; 芽孢具有厚而致密的壁,透性差,含水量低,折光性强,不易着色。在加热条件下加入着色力强的染料,让芽孢、菌体与染料作用较长时间,使芽孢染上颜色,再使菌体的颜色脱去;然后再用另一种与前者颜色不同的对比度强的染料对菌体复染,使芽孢和菌体分别呈现出不同的颜色,因而能更明显地衬托出芽孢,以便观察。
荚膜是一层覆盖在某些细菌细胞壁表面的粘性物质,主要成分是多糖类。荚膜与染料的亲合力较差,不易着色。荚膜的通透性好,某些染料可透过荚膜而使菌体着色。因此,常采用负染色法将菌体和背景着色而荚膜不着色,因而荚膜在菌体周围呈一透明无色圈。
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