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- 2018-06-06 发布于贵州
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抗生素精品课件精液的稀释
第四节 精液的稀释 精液稀释,是往精液中加入适宜精子体外存活并保持受精子能力稀释保护液。只有经过稀释的精液,才适于保存、运输及输精等。所以,精液稀释处理是动物人工授精中的一个重要技术环节。精液稀释的目的,在于扩大精液的容量,延长精子的存活时间,增强受精能力,增加受配母畜头数,充分提高优良种公畜配种效率。 一、稀释液中各种成分及作用 (一)糖类 精液稀释液中加入的糖类,一般常用的有果糖、葡萄糖、乳糖和蔗糖等,这些糖类主要作用是提供精子营养,补充精子能量。 (二)缓冲物质 以利于精子的存活,如磷酸二氢钾、磷酸二氢纳、碳酸氢纳等盐类。近年来还常用一些有机缓冲物质,如三羟基甲基甲烷(Tris)简称三基,及乙二胺四乙酸二钠(EDTA)等。 (三)蛋黄和奶类 在稀释液内加入一定量的蛋黄和奶类(包括鲜全乳、脱脂乳或纯奶粉)。这些物质具有调节渗透压、降低精液中电解质浓度、保护精子膜等作用,有利于精子存活。同时对精子也具有防冷抗冻的作用,这是因为卵黄和奶类中所含的卵磷脂,其熔点比精子内的缩醛磷脂低,这样卵磷脂进入精子体内后,可以代替缩醛磷脂,在低温下不易冻结,从而保护精子的生存。此外,脂蛋白以及含磷脂的脂蛋白复合物也具有防止冷休克的作用。 (四)抗冻害物质 一般多采用甘油和二甲基亚砜(DMSO)等,这些物质常被加入精液稀释液内。由于精液在冷冻或解冻过程中,精子内外环境的水分,必将经历液态和固态的转化过程,这物质转对精子的存活及为有害。而抗冻保护物质则有助于减轻或消除这种危害。 (五)抗生素 在精液稀释液中必须加入一定量的抗生素,如:青霉素、链霉素、卡那霉素、林肯霉素、多粘菌素、氯霉素等。在家畜人工授精过程中,各个环节即便在严格的操作下,有时精液也难免受到某些有害微生物的污染。在精液内加入抗生素的目的,就是达到保护精子的抗菌效果。在精液稀释液中加入抗生素,是抑制精液内细菌繁衍的一种常规方法。 (六)添加剂 1.酶类:如过氧化氢酶,它能分解精子代谢过程中产生的过氧化氢,消除其危害,有利于维持精子活率。加入β-淀粉酶具有促进精子获能,提高受胎率活率的作用。 2.激素类:添加催产素、前列腺素等,可促进母畜生殖道的蠕动,加快精子向受精部位运行,从而提高受胎率。 3 .维生素类:维生素B1、维生素B2、维生素C等,有利于精子存活。其他添加成分如CO2、乙酸、植物汁等,可降低精液稀释液的pH值,有助于精子常温保存。 二、稀释液种类 (一)现用稀释液 适用采集的鲜精液经稀释后立即输精。此类稀释液常以等渗糖类或奶类,也可用生理盐水。 (二)常温保存稀释液 适用于室内短期常温保存,具有pH值较低的特点。也有用含明胶的稀释液。 (三)低温保存稀释液 适用于精液低温保存,其成分较复杂,除含有糖类、卵黄外,还有甘油或甲基亚砜等抗冻害物质。 (四)冷冻保存稀释液 用于精液的冷冻保存,含有二甲基亚砜、甘油等抗冻物质。 三、稀释液的配制 (一)各种成分的准备 1.蒸馏水 应现用现制或应用灭菌蒸馏水,最好采用灭菌的双馏水。如果无蒸馏水,也可用离子交换水或冷却沸水代替。但沸水应在冷却后用脱脂棉和滤纸过滤2~3次,而使用沸水时应经精液保存试验后,证明对精子无不良影响后方可利用。 2.化学药品 所用糖类和盐类等物质,一般应采用化学分析纯的药品,配制时称量要准确,待药品充分溶解后经过滤,密封后进行消毒(隔水煮沸消毒、蒸汽或高压灭菌消毒)。在消毒过程中应缓慢加热,以防玻璃容器爆裂 3.奶类 所用的奶类(包括全奶和脱脂奶、纯奶粉或脱脂奶粉等)必须是新鲜的,而且不应含其它物质如糖、果汁、微量元素或其他添加剂等,以防影响精液的渗透压,影响精子的存活。将一定量的鲜奶或充分的奶粉溶液,经过滤后,再置于92℃~95℃的水中进行10min灭菌,取出降温去奶皮后备用。 4.卵黄 取卵黄方法,是用最新鲜的鸡蛋,先将外壳洗净擦干,再用75%酒精消毒外壳,待酒精挥发后,轻轻破壳,尽量除去蛋清,再用灭菌注射器刺破卵黄,或者将卵黄倾倒于灭菌的滤纸或玻璃平皿内,以灭菌镊子挑破卵黄膜,轻轻倾出卵黄入灭菌量杯内,但注意不可混入蛋清和卵黄膜。 5.抗生素 常用抗生素为青霉素钾盐和双氢链霉素。抗生素必须在灭菌稀释液冷却后方可加入,氨苯磺胺也是一种常用的抗菌物质,将其溶于少量蒸馏水中(用量要计入总量),单独加热至80℃,待完全溶解后加入稀释液内。一般用量为每毫升稀释液内,加入青霉素500~1000IU、链霉素
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