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生物标本的制作 铜川市第一中学 张卫红 2011年7月 玻片标本制作方法 从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。从制作的方法 来分，有涂片、压片、装片(也叫整装法)、磨片和切片等 。 一、切片法 切片法即用刀片将材料切成薄片的方法 1.徒手切片法 简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法 。 （1）材料和夹持物 （2）材料的持法 （3）持刀方法 （4）切片 （5）取片 （6）选片、装片 2.石蜡切片法 所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀，还能作连续切片，但制作手续较复杂 。 几个重要环节步骤如下： (1)固定 其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似；必须对固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的等加以注意。 (2)冲洗 (3)脱水 酒精是最常用的脱水剂，把酒精配成不同梯度的浓度缓慢进行。 (4)染色 (5)浸蜡 将已透明的材料投入熔化的石蜡中，取代透明剂，使组织中空隙为石蜡透入而填满； (6)切片 用石蜡包埋块包埋的石蜡块，经修整后一般使用旋转式切片机进行切片； (7)透明 透明在两种情况下进行。 第一，透明是在组织脱水后浸蜡前进行，其目的不在于为了显微镜观察，而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此，透明剂必须既能与酒精混合，又能与石蜡融合无间，二甲苯即具此性质，故被选为常用的透明剂。 第二，透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水剂进入封藏剂的桥梁外，尚有使标本透明而便于观察的作用。 (8)封藏 常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便于镜检。 3.火棉胶切片法 火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料(如脑)的切片，也因火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片 。 4.冰冻切片法 冰冻切片法是将已固定或新鲜组织块不经脱水和包埋先进行冰冻，然后在切片机上切片的一种方法。这种方法的优点是：1.制片速度快，因此常用于临床上的病理手术诊断；2.能保存组织内某些易被有机溶剂所溶解的物质，例如脂肪和酶等。 同时还可以防止组织块的收缩保持原形。缺点：所切片子较厚，又不能作连续切片还有易碎的毛病。 二、非切片法 1.涂片法 是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液，含有细菌的培养液以及精巢、花药等 2.压片法 将植物或动物比较疏松的材料，如花药、根尖、水螅，蠕虫的精巢、果蝇(或其他双翅目)幼虫的唾液腺等，用较小的压力压碎在载玻片上使成一薄层的一种制片法。 ? 3.装片法 微小的生物如衣藻、水绵、青霉、变形虫和水螅等可以直接作为装片的材料植物的叶表皮、鳞茎表皮等；动物中如昆虫的翅、腿、口器等；人的口腔上皮细胞等都是从整个器官上取其一部分作为装片材料，可制作成临时或永久装片，进行观察。 4.悬滴法 悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料(如变形虫的运动、细菌的活动、花粉的萌发等)封闭在载玻片的小室里，供观察它们活动的一种玻片标本。 5.磨片法 一些含有矿物质的比较坚硬的动物组织要作成玻片标本时，常把材料直接放在砂石上磨成薄片，此法即为磨片法。如珊瑚的骨骼、软体动物的贝壳，脊椎动物的硬骨、角以及牙齿等都可以用此法制成玻片标本。 植物标本的采集与制作 植物标本包含着一个物种的大量信息，诸如形态特征、地理分布、生态环境和物候期等，是植物分类和植物区系研究必不可少的科学依据，也是植物资源调查、开发利用和保护的重要资料。在自然界，植物的生长、发育，有它的季节性以及分布地区的局限性。为了不受季节或地区的限制，有效地进行学习交流和教学活动，也有必要采集和保存植物标本。 国内外主要植物标本馆简介 据不完全统计，目前世界上约有大小植物标本馆（室）2639个，共收藏标本近3亿份。这些标本的76%保存在15个国家内，其中美国占22.1%，法国占7.4%，原苏联占6.6%，英国占5.7%，德国占5.6%，中国占3.7%。世界上馆藏100万份以上的标本馆有55个，其中500万份以上的标本馆有7个。这55个标本馆分布在22个国家，其中美国最多有12个，其次是英国、瑞典、德国和原苏联各4个，再次是法国、瑞士、日本各3个。上述数据表明植物标本收藏数量与国家的发达程度成正相关，不仅发