川牛膝多糖制备、结构解析及其体外抗病毒活性研究.pdfVIP

川牛膝多糖的制备、结构解析及其体外抗病毒活性的研究 刘颖华 (微生物学) 指导教师:何开泽 副研究员 摘 要 It}牛膝(CyathulaofcinalisKuan)是一种具有重要药理作用的常用传统中药，现代药理 研究表明其所含的多糖成份是许多生物活性的物质基础，如前人研究证明川牛膝多搪具有 促进红细胞免疫、抗肿瘤、减轻环磷酞胺Cy(Cyclophosphomidum)所致外周白细胞减少 等疗效。为了进一步了解其生物活性，并为构效关系的研究奠定基 们利用本实验室 开发的专利方法从川牛膝中提取到一小分子量多糖，对其进行了如 1.提取粗多糖CPc，利用685弱碱阴离子交换柱层析和Bio-GelP2分子筛柱层析制 得纯品多糖RCP; 2.RCP经紫外扫描(UV)、高效液相色谱(HPLC)和聚丙烯酞胺盘状凝胶电泳(PAGE) 鉴定为纯品; 3.用薄层正交法确定了RCP完全水解和部分水解的最佳条件; 4.薄层层析 (TLC)、红外光谱 (1R)、质谱 (MS)、核磁共振 (NMR)、高碘酸氧化 与Smith降解、甲基化与还原裂解乙酞化等分析表明川牛膝多糖RCP是以果糖为主，葡 萄糖为辅的峡喃型的高度分支的果聚糖。果糖以0构型存在，葡萄糖以a构型存在。RCP 的平均聚合度DP=15，以((2-1)连接为骨架，其上有大盈 (2--6)连接的分支，分支长 度为2个果糖残基，葡萄糖主要以新蔗果三糖的形式存在于链中，但 ((2-6)分支的具体 位置不能确定; 5.用细胞病变效应法和MTT染色法测定了RCP及其硫酸酷衍生物S-RCP的体外抗 HSV-2和HBV的活性。实验证明RCP本身无抗病毒活性，而硫酸酣衍物S-RCP获得抗 HSV-2的活性。 令 关键词:川牛膝，多糖 抗病毒活性 1`Z}{1 .t Studiesonthepreparation,structureanalysisandantiviralactivities invitroofpolysaccharidefromCyathulaofficinalisKuan YinghuaLiu(Microbiology) DirectedbyAssociateProf.KaizeHe ABSTRACT Cyathulao挤cinalisKuanisacommonly-usedtraditionalChineseherbalmedicinewitha widerangeofpharmacologicalactivities.Modern pharmacologicalresearchesshowthe polysaccharideextractrfomitisthebasicelementformnaybioactivities.Formerstudiesprove thepolysaccharidehastheabilitytoimprovemouseredcellimmunityfunction,suppressthe growthofmousetumornadlivercnacercells,inhibit加ripheralwhitebloodcelldecrease causedbyCyclophosphomidum(Cy)invivo.Inordertoinvestigateitsbioactivitiesfurthernad layfoundationofthefuturestudyontheSturcture-Functionrelationship,weisolateda low-molecular-weightpolysaccharide(RCP)rfomCofeinalisKuanwithpatentmethod establishedbyourlabnadcarriedoutthefollowingworks: 1.ThecurdepolysaccharidenominatedCPcwasp