血清白球蛋白分离、纯化及鉴定试验用.ppt

血清白蛋白、γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定 目的要求 (一)掌握分离纯化蛋白质的基本原理。  (二)了解柱层析技术。 （一）分离纯化的意义 ①从生物材料中分离制备蛋白质、核酸，研究其结构与功能，对于了解生命活动的规律，阐明生命现象的本质有重大意义。 ②工业生产的需要：食品、发酵、纺织、制革等工业，需要大量的高活性的酶制剂。如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等。 ③医疗的需要：如用猪胰岛素治疗糖尿病。 ④基因工程的需要 （二）分离纯化的要求 1、纯度：主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作为研究蛋白和一级结构、空间结构，一级结构与功能的关系的蛋白质制剂、工具酶和标准蛋白、酶法分析的酶制剂，都要求均一；工业、医药方面应用的酶和蛋白质制剂，达到一定纯度即可，不要求均一。 2、活性：要求大分子保持天然构象状态，有高度的生物活性。 3、收率：希望收率越高越好，但在分离纯化过程中总有不少损失。而且提纯步骤越多，损失越大。 （三）分离纯化的一般程序 生物大分子的分离纯化一般可分为以下几个阶段： ①材料的选择和预处理 ②破碎细胞及提取（有时还需要进行细胞器的分离） ③分离纯化：包括粗分级分离和细分级分离 其中前两个阶段为生物大分子分离纯化的前处理。 常用的蛋白质分离纯化技术 一、盐析（中性盐沉淀） 在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。