[物理]分析仪常用光学知识.doc

第一章 生化分析仪所用光学基础知识 一个人员，要了解掌握就容易做到融汇贯仪器分析法的研究对象是化学物质，测量的不是物质本(如对光)同它 随着电子技术，计算机技术，激光技术等新技术的发1·光学分析(建立在物质与辐射能2·电化学分析法(以电，化学的原理为)，3·色谱分析法4·热分析法 光分析法中物质与辐射能关系表现的主要物理性质及测I-1。当物质与辐 1-l 被测物理性质 相应分析方法 光 谱 法 辐射的吸收 辐射的发射 辐射的散射 分光光度法(X射线、紫外、可见，红外)，此色法；原子吸收法；核磁共振波谱法等 发射光谱法；火焰光度法，荧光法，放 射化学法 浊度法，散射浊度法，拉曼光谱法 非 光 谱 法 辐射的折射 辐射的衍射 辐射的旋转 折射法，干涉法 X射线衍射法，电子衍射法· 偏振法；旋光色散法等 射能作用时，物质内部产生量子化的能级跃迁(即组成物质)时，测量由此产生的发射、吸收本书内容都是由物质对辐射吸收光谱法引起的介绍与讨hγ=he/λ 式中：E为光子的能量（J：焦耳），h为普郎克常量（6.63×10-34J·s），γ为频率，λ为波长。 从能量公式可知，由于紫外波长比红外波长短，所以紫外辐射的光子比红外辐射的光子具有更高的能量。通常波长越短，能量越大，波长越长，能量越小。 电磁波谱； 就广义言，各种电磁辐射都属于光谱我们通常讲的(本书中讨论的光谱)，而人类眼睛能辨认的光又仅为光波区内波长为78 0 nm范围的可(简称IE) 根据标准观察者的试验定义了此波长范围的辐射为可见光。 下图给出了按波长划分波谱区的电磁辐射图中显见400nm或大于760nm的紫外或红外光都是人们眼睛看不见的光，称为不可见光。 复习题： 1.了解光谱的大概范围。记住波长的单位换算关系。(米、分米、厘米、毫米、纳米等) 第二节 光对物质的选择吸收 一、光对物质的选择吸收 不同溶液呈现不同的颜色，这是由于物质对光选择性吸收的缘故。在光照射下，如果可见光完全被吸收，则溶液呈黑色。冬天穿黑色衣服保温也是这个道理。如对可见光波不怎么吸收，则溶液显得透明无色；对不同波长的可见光具有选择性地吸收，则溶液呈现不同的颜色。例如：当白光通过氯化钴溶液时，它选择的吸收了蓝、绿色光，而其他颜色的光很少被吸收或不被吸收而通过溶液，因而氯化钴溶液就呈现出透过光的颜色为红色。 通常用光的吸收曲线来描述溶液对各种波长光的吸收情况。使波长不同的光通过对某一固定浓度的有色溶液，然后测量溶液对不同波长的吸收程度（吸收度）。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘出的曲线叫吸收曲线。 图1.1 氯化钴溶液的吸收曲线 图1.2 互补色光示意图 从图1.1中的曲线可知在510nm处氯化钴对红光不吸收所以呈红色。 物质对光吸收最大处叫吸收峰，不同物质对光吸收的吸收峰不同。吸收曲线反映了溶液对光吸收的选择性。吸收程度随浓度增加，因此，可以选择一部分波长被吸收程度即吸光度来测定溶液的浓度。 二、 比色分析的基本理论 许多化学物质具有颜色，有些无色的化合物也可以和显色剂作用，生成有色物质。事实证明，当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随之改变。浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。 溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用吸收定律来描述。 当一束平行单色光照射到均匀、非散射的溶液时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液、一部分被比色皿的表面所反射。设入射光的强度为Ｉ0， 吸收光的强度为Ｉa，反射光的强度为Ｉr，透过光的强度为Ｉt 。则它们之间有如下关系： Ｉ0＝Ｉa＋Ｉr＋Ｉt 在实际比色分析时，所用的比色皿都是同质料、同规格的，所以反射光的强度为一定值，不会引起误差。即反射光的影响可以不加考虑。这正像我们比较两个人的高低一样，无论站在地面上还是站在台子上，两个人的相对高度是不变的。这样，上式可简化为： Ｉ0＝Ｉa＋Ｉt 当入射光的强度一定时，被吸收的光的强度越大，透过光的强度就越小。这就是说：光强的减弱仅仅与有色溶液对光的吸收有关。 在比色分析中，常把透过光的强度占入射光的强度的百分比（Ｉt／Ｉ0）％) 称为透过率或透射比，用Ｔ（或τ）表示。即 Ｔ＝（Ｉt／Ｉ0）％ 。 Ｔ越大，表明有色溶液的透光程度越大。 当一束平行单色光通过稀释的有色溶液时，由于溶液吸收了一部分光线，光线的强度就要减弱。溶液的浓度越大、透过的液层越厚、 入射的光线越强，对光线的吸收就越多。如果入射光的强度不变，则光的吸收只与液层厚度及溶液的浓度有关。它们之间的关系可以用下式表示： Ａ＝ＫＣＬ 式中：Ａ为吸光度, 也被称为消光度Ｅ，或光密度Ｄ（Ｏ.Ｄ）； Ｋ为