人类疾病动物模型2PPT.ppt

胃癌移植瘤模型 注意：选用皮下移植还是选用原位移植，关键取决于你的实验目的，具体的实验方法和手段都是为你的研究目的而服务的。如果你只是观察某种药物对某种胃癌细胞的体内作用，做皮下瘤就行，当然做原位移植更好；如果你要研究胃癌细胞的侵袭或转移，就要做原位移植了。 方法：1）术前准备：眼科剪2把，眼科镊2把，培养皿2个，1ml 注射器1套，小鼠固定板，眼科小圆针2根，8/0丝线、3/0丝线若干消毒备用。无菌手术衣、手套、口罩、帽子；麻醉剂、甲醛固定液、生理盐水、RPMI-1640培养液、超净工作台或层流柜。术前1小时紫外照射30分钟。 2）移植方法：取6-8周健康裸鼠，术前禁食12小时，以0.5%的戊巴比妥钠麻醉，消毒，选择左侧正中旁切口，打开腹腔后将胃拉出，用眼科剪细心剪破腺胃胃壁浆膜，将瘤组织块埋入浆膜下，再以8/0丝线穿透全层将瘤组织缝挂在胃壁上，最后以4/0丝线分别缝合腹膜（含肌层）及皮肤。若以肿瘤细胞悬液或细胞培养液移植时，可用注射器刺入胃壁浆膜注射。注射后，应观察到明显隆起的小包。否则，可能是穿透胃壁，注入胃内。应重新再试。 3）术后观察：术后1周左右动物伤口愈合，皮肤缝线脱落。术后第3-4周左上腹可触及0.2cm-0.3cm的小结节， 5-6周左上腹结节逐渐增大且质地变硬。8-10周左右可触及1.0cm-1.5 cm的包块，左上腹包块透壁可见，表面呈结节状，动物逐渐消瘦。12周以后动物极度消瘦，活动受限，部分动物瘤体突出至皮下。16周以后动物拒食，逐渐衰竭而死亡。生存期约为16-24周。 ?高血压的研究 最常用的是犬和大鼠。 犬与人类的高血压有很多相似之处：1.高血压早期波动较大，以后逐渐升高，并维持在高水平；2.环境和紧张刺激引起血压明显升高；3.高血压发展过程中出现高级神经活动障碍；4.部分动物血中儿茶酚胺含量增加。 若研究高血压病理、生理和药理，SHR（自发性高血压大鼠）是良好的模型，1.遗传因素占主要地位；2.高血压早期无明显器质性改变；3.病程相似，血压升高随年龄增加而加剧；4.紧张刺激和大量食盐等环境刺激加重高血压的发展，5.血压上升早期或高血压前期有高血流动力学的特征；6.发生继发性心血管损害，出现心脑肾合并症。 实验性高血压动物模型 复制实验性高血压模型常选用犬、猫、家兔和猴等，复制方法很多，如通过神经反射、外源性儿茶酚胺类或其他体液加压物质的注射直接刺激中枢神经系统等。 1．听源性高血压 采用大白鼠与家鼠杂交生的大灰鼠（比纯种大白鼠较易诱发成功），4月龄，放入隔音室内笼养，噪音刺激可由电铃或扬声器发出，发音器是一个音频振荡器，连接一个20W高音扬声器。噪音刺激应经常在700～1000周/秒中变换，噪音刺激每30秒一次，亦可每隔1分钟刺激30秒。可随时变换毋须恒定，但噪音干扰须日夜不止，连续数月。噪音刺激连续3个月后血压普遍升高，大灰鼠正常平均收缩压为113±8mmHg，此时可升高到130～140mmHg，有40%动物收缩压可高达160mmHg。此种高血压动物模型与人的高血压病相类似，适用于降药物的筛选。 2. 缩窄肾动脉法。 缩窄肾动物致高血压是十分经典的动物模型。肾动脉缩窄可造成肾脏缺血，导致肾脏内肾素形成，血管紧张素含量增加，使血压升高，晚期高血压维持因素也包括神经血管机制。下面以犬和家兔为例，介绍动脉缩窄性高血压动物模型的复制方法。 将犬和家兔麻醉后，腹向下固定，腹下垫一长枕使腰部顶起，从脊柱旁1.5-2㎝处开始，右侧顺肋骨缘，左侧在离肋骨缘约两指宽的地方作4 ㎝长的皮肤切口。切开皮下组织和腰背筋膜，并在内外斜肌筋膜连接处旁边，切开内斜肌筋膜，推开背长肌，暴露盖在肾周围空隙上的腹横机肌腱。顺肌纤维切开肌肉，并将肌肉分离开。用手指通过手术区摸到肾脏，并在肾切迹与主动脉之间找到强力搏动着的肾动脉。按所需长度，小心地钝性分离出一段肾动脉。选用一定直径的银夹或银环套在肾动脉上，或者用缝线将相应直径的铁圈绑扎在血管上面，将缝线结扎紧后取下铁圈。如果是单侧肾动脉缩窄，则应将另一侧肾切除。后一手术在间隔10-12天进行。一般肾切除手术后几天，血压开始升高，1-3月后达到高峰。并可长期维持下去。 3．肾外包扎性高血压 肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，血压上升。 选用120～150g大白鼠，麻醉后，皮肤消毒，从第10胸椎到第3腰椎处沿脊椎中线切开皮肤，在左侧季助下1.5～2cm和距脊椎1cm处用小血管钳分开肌肉，用两脂从腹下部将肾脏自创口中挤