实验六_考马斯亮蓝染色显示细胞骨架20094课件.ppt

考马斯亮蓝染色显示细胞骨架;一、实验目的;二、实验原理;作用：在细胞的形态维持、细胞的运动、物质运输、能量转换和细胞分裂中发挥重要作用。 三种组成成分： 微丝、微管、 中等纤维;细胞骨架的特征;免疫荧光染色： 左：微丝，中：微管 ，右：中等纤维;微管;;微管的功能：;肌细胞：微丝形成特定的稳定结构； 非肌细胞：微丝常分布在细胞膜下方，多呈现一种动态结构。;中等纤维;显示细胞骨架的非特异性方法;显示细胞骨架成分的特异性方法;电子显微镜下的细胞骨架;三、实验用品;四、实验操作;3．将②③管中的表皮夹出，分别放入④⑤0.5ml 3%戊二醛固定液的离心管中固定20分钟。 4．将④⑤管中的表皮夹出，分别放入⑥⑦0.5ml的磷酸缓冲液的离心管中洗两次，每次5分钟（洗完吸掉液体）。 5．在⑥⑦管中的表皮夹出，分别放入⑧⑨0.5ml的0.2%考马斯亮蓝R250染液中，染色10分钟。 6．夹出⑧⑨两管中的表皮，再放入⑥⑦管中，各加入0.5 ml磷酸缓冲液洗一次，5分钟。然后将表皮（带少量液体）平铺在载玻片上，加盖玻片，显微镜下观察。;①;;注意事项;五、作业;六、思考题;;;;值日