扩增活化的自体淋巴细胞技术医学.pptx

EAAL 扩增活化的自体淋巴细胞治疗肿瘤技术简介Introduction of EAAL Therapy肿瘤免疫治疗的机制Mechanisms of Cancer Immunotherapy通过调动机体自身的免疫系统，达到控制肿瘤生长，杀伤肿瘤细胞的目的。前提：肿瘤细胞有别于正常细胞肿瘤抗原肿瘤特异性T细胞免疫应答肿瘤特异性抗体免疫应答天然免疫对肿瘤细胞的杀伤作用如何达到有效的免疫治疗效果有足够可以识别肿瘤抗原的杀伤性T细胞机体的免疫环境有利于上述细胞发挥抗肿瘤功能Th1/Th2Treg这些T细胞可以到达肿瘤组织局部T 细胞归巢在肿瘤局部，这些T细胞可以发挥有效的杀伤功能肿瘤基质及肿瘤组织微环境肿瘤的免疫治疗方法Approches of Cancer Immunotherapy肿瘤疫苗过继细胞免疫治疗细胞免疫治疗Cellular Immunotherapy包括肿瘤在内的多种慢性病的最重要的生物治疗方法之一肿瘤的细胞免疫治疗：非特异性※ LAK细胞※ CIK细胞※ EAAL细胞特异性※ Provenge,树突状细胞 ※ 肿瘤特异性T细胞 -其它慢性病的细胞免疫治疗：※慢性病毒感染性疾病乙肝、丙肝艾滋病※慢性寄生虫感染※糖尿病※多发性硬化症※系统性红斑狼疮扩增活化的自体淋巴细胞（EAAL）的定义自体免疫细胞治疗技术CD3+ T淋巴细胞为主（95.91%±0.24% ），含少量NK细胞体外扩增活化肿瘤杀伤功能改进的LAK和CIK治疗：细胞培养效率和肿瘤杀伤能力显著增强EAAL是Expanded Activated Autologous Lymphocytes（扩增活化的自体淋巴细胞）的简称。其定义是通过采取机体自身20-100ml静脉血，分离获得0.8-3 x 107外周血单个核细胞，经过体外无血清培养基培养，获得以CD3细胞为主的，包含CD8+ T淋巴细胞、CD4+ T淋巴细胞、CD3+CD56+ NKT细胞、NK细胞， 细胞数量在3 x 109以上的活化的混合淋巴细胞，这些细胞在体外具有明确肿瘤杀伤功能。 EAAL技术特点使用无血清淋巴细胞培养基进行细胞培养，保证没有潜在的病源微生物感染细胞扩增的高效性和高活性:扩增效率约为200?1000倍不需使用单采机，对患者免疫系统没有破坏作用独特的细胞培养工艺，少量外周血即可满足多次细胞回输的要求可与化疗联合，完全满足多个化疗疗程对细胞治疗次数和细胞治疗数目的要求，从而产生较好的协同治疗肿瘤效果。可进行多次、高频治疗，达到最好的治疗效果EAAL技术的临床-实验室操作流程外周血20-100ml回输100ml/次，1-8次收集诱导的杀伤细胞扩增及活化培养及扩增14-35天EAAL的作用机制研究自体肿瘤细胞的体外杀伤效应（IFN-γ）EAL联合化疗的体外杀伤效果培养后的淋巴细胞与顺铂以不同序贯方式联合对PLA-801D细胞的抑制率Groupinhibited rates(%)QDDPEAALDDP+EAAL淋巴细胞作用前10h顺铂淋巴细胞作用前8h顺铂淋巴细胞作用前4h顺铂淋巴细胞作用同时顺铂淋巴细胞作用后4h顺铂淋巴细胞作用后8h顺铂淋巴细胞作用后10h顺铂46±1.741.7±3.035.8±1.327.1±2.418.5±1.316.7±2.214.0±0.916.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.488.1±0.64*88.9±0.16*96.7±1.99*55.8±0.33*73.6±0.67*66.2±0.12*53.2±0.14*1.6021.7322.0801.4242.2972.1691.885(注：联合作用组、单顺铂组和单淋巴细胞作用组抑制率进行单因素方差分析,P0.01 *) EAL细胞的肿瘤抗原特异性分析Donor　A2-01A2-02A2-03Cancer AntigenNY-ESO-1BC(%)0.170.860.32AC(%)1.122.572.3Multiple6.59 2.99 7.19 MAGE-1BC(%)0.390.070.1AC(%)1Multiple0.64 16.43 5.10 MAGE-3BC(%)0.450.060.07AC(%)0.280.360.36Multiple0.62 6.00 5.14 MAGE-10BC(%)0.520.150.23AC(%)8Multiple0.48 1.47 2.09 P53BC(%)0.631.130.78AC(%)5.2712.248.7Multiple8.37 10.83 11.15 HIVBC(%)0.590.20.22AC(%)1Multiple0.41 1.25 1.41 FLUBC(%)1.060.60.66AC(%)4.441