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核素示踪技术;第一节 示踪原理及特点 一、定义：示踪剂→吸收、分布、排泄、研究转移规律及研究疾病、诊断的一门科学。 示踪技术解决实际问题，不能取代的特点： 引入物不能太多的……太小…… 示踪技术发展过程： 二、基本原理：Tracer与未标记时的化学、生物学性质相同，利用放射性可测量进行示踪物跟综研究（位置、数量、转变）。 ;三、示踪研究特点： 1、灵敏度高，可达10-14-----10-18g 2、测定方法简单、不用分离，提纯…… 3、合乎生理条件 4、可定位研究和定量研究 5、可动态研究，对数据做动态分析 6、标记分子易分辨（新旧分子的鉴别） 7、非创伤性 四、常用实验类型 ： 离体示踪 整体示踪 单标或多标示踪 ; 1、选择实验类型的几个原则 a.吸收、分布、转运、排泄等用整体示踪实 验； b.研究物质在精细结构中运动规律，可选离 体实验，但结果须有整体实验验证； c.物质转化的研究，离体、整体都得做； d.单用离体实验有时可能得出错误的结论。 ;2、示踪物选择应考虑的问题 1）射线类型：γ、β（中能、低能……） 2）T1/2： 3）放化纯：95% 4）比活度：要合适 5）标记位置的选择要根据实验来定 6）标记物的稳定性、价格 7）载体的量大小：载体指与放素化学状态相同的稳定同位素、如51Cr中混有Cr、稳定性的Cr就是戴体。 ;3、示踪量的估算： 预实验或前人经验，应注意人体内的稀释、组织内的浓聚及对动物健康的影响 措施：查文献+预实验+确定仪器效率;4、示踪引入途径：口服、灌胃 v 、m、皮下、腹腔。 5、样品制备要有利于定量、定位测量、测量方法确定后，要考虑样品容量，测量时间等问题。 6、数据处理：根据不同实验目的，选择适当参数。 7、动物实验：合适的动物，包括大小、动物特征、防护、尸体处理。 8、短半衰期核素要考虑衰变校正;六、示踪实验中的同位素效应 1、同位素效应：不同的同位素之间原子质量差异较大，因而它们参予同一化学反应的速度不同称之。 如：1H（ p）e（周期表中的H） 2H（n、p）e 3H (2n、p)e 表示方法：以同位素间参与化???反应的速率常数的比值来表示，如KH/KT KH/KD 氢的同位素表示法;2、同位素效应的分类： 1）初级同位素效应：与放素连接的化学健对速度的影响（主键） 2）次级同位素效应：与放素相邻的化学健对速度的影响（次健） 3）溶剂同位素效应：溶剂中的某原子被同位素取代而影响溶质的反应速度，如一般化学反应在水中，若改为氘水，对反应速度的影响。 4）物质体系同位素效应：进入体内后对生化反应速度的影响，如H2O改为2H2O喂养动物对生化反应的影响。; 核素稀释法 核素稀释法测物质含量 原理：稀释前后放素的量不变。（忽略衰变、排泄等因素） 1、测血容量或体液含量：Cl和Br的放射性同位素主要在细胞外液分布，进入细胞极少。如用82Br引入体液中，引入的总活度为A（β-），待一定时间混匀后，抽取少量体液测得比放为q/ml，则体液量等于A/q（ml），即 C1V1=C2（V1+VX） ;2、测Rbc寿命或其它细胞寿命 取Rbc与Na51CrO4混合，淋洗后Rbc即被标上，引入体内不同时间测放，研究其寿命。 另一种方法：15N—甘氨酸引入血液，Rbc合成时摄取15N—AA，因此新生成Rbc具有放射性，30天左右15NRbc达高峰，并且保持一定时间恒定，最后15NRbc逐渐死亡而放射性下降，可算得Rbc寿命。同理，该法可研究Wbc、肿瘤细胞等。 ; 原理：将已知比活度的标记物与非标记物混合，测出混合物的比活度，可求出非标记物的含量。（混合前后放射性不变的原理） 设：已知标记物的量为m1，比活度为S1（dpm/mg）混合物测得比活度为S2（dpm/mg），求混合物中非标记物的化学量mx 据混合前后放射性不变原理得 S1m1=S2(m1+mx) Mx=m1(s1/s2—1) 举例：134（参考实验核医学与核药学，胡亚儿、刘长征 等主编）;4、反稀释法：用已知非标记物测 标记物含量。 原理：同3（135） 设： 已知非标记物的量为m2 已知标记物的比活度为S1 混合后测得的比活