【精品】结核病实验室涂片镜检技术70.ppt

结核病实验室涂片镜检技术;结核病基本情况： （1）;全球结核病告急 ;我国结核病现状 ;我国结核病现状 ;我国结核病现状  —我国历次流调疫情;结核病细菌学检查的重要作用;分 枝 杆 菌 生 物 学 基 础;概 述;分类;概 述;分枝杆菌分类;结核分枝杆菌结构;细 胞 壁;细 胞 膜; 菌 体 成 分; 脂 类（1）;脂 类（2）;多 糖;蛋 白 质;核 酸;结核分枝杆菌基因组;盐 类;  营养与发育;结核分枝杆菌形态;抗酸性是分枝杆菌的重要特征。其化学基础是分枝菌属的细胞壁脂质含量较高，并含有大量分枝菌酸。 抗酸性与细菌细胞壁的完整性关系密切，若菌体自溶（如标本保存时间过长、温度过高）、结核菌的异型相（如：L-型菌、干酪或脓液中的结核菌）可能失去抗酸性。 ;生 长 特 性; ;实验室检查;结核病细菌学诊断;结核病细菌实验室布局原则;基层镜实验室布局范例;废弃标本和污染物的处理;主要方法;痰标本采集 (一);痰标本采集 (二); 对疑似肺结核病者，临床医护人员应通过解释，使其充分了解标本性状、质量对相应检查项目的重要性，示范并指导其掌握从肺部深处咳痰的方法；如患者识字，可提供宣教材料。 ;如何正确留痰; 患者留取的痰标本，应由检验人员或经过培训的专人目视检查标本性状质量(特别是用于初次诊断的痰标本)：标本量一般在3～5 ml，标本性状属于干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰者为合格的标本；唾液为不合格标本。 确定诊断检查时痰标本不合格者，医务人员应予以进一步指导并要求其重新送检。 进行AFB涂片检查时应在登记本和检验报告单上注明标本性状，以供分析结果时参考。 ;痰标本采集 (五);1、干酪痰：标本外观以黄色(或奶酪色)、脓样、团块状的肺部分泌物为主，粘度较粘液痰低，制片时较易涂抹；涂片染色后镜检，可发现大量脓性炎症细胞、肺上皮脱落细胞。由于此类标本是由肺部深处咳出，对肺结核的诊断最有价值，故AFB的检出率较高。;痰标本性状 (二); 3、粘液痰：标本外观以白色、粘稠度较高的肺部和支气管分泌物为主，制片时需仔细涂抹；涂片??色后镜检时，镜下可见支气管内膜纤毛柱状上皮细胞(细胞较长且形态不规则、细胞核和细胞质着色均较深，细胞一端可见着色较浅的纤毛)，伴有少量肺上皮脱落细胞(多数形态不规则、细胞核较小且着色较细胞质深，核质比大于 1:3)、脓性炎症细胞(卵圆形、细胞核占细胞比例较大且着色较深，核质比低于 1:1)、口腔脱落细胞及口腔寄生菌。此类标本的AFB检出率较唾液高。 ;痰标本性状 (四);抗酸染色原理;细菌学常规检查 —直接涂片法;细菌学常规检查 —直接涂片法;（一）为防止抗酸杆菌的交叉污染，严禁油镜头直接接触玻片上的痰膜。 （二）仔细观察300以上的视野。 （三）每个工作日，一名镜检人员的玻片阅读量一般不应超过25张。 （四）连续阅读10～12张玻片后，应休息20分钟左右。 ;;;;细菌学常规检查 —直接涂片法;细菌学常规检查 —直接涂片法;细菌学常规检查 —直接涂片法; 涂片镜检质量保证系统 —室内质控;涂片镜检质量保证系统—室间质控;一、实验室现场评估; 结核病实验室基本情况登记表;现场评估调查程序 1.试剂; 2. 耗材保障;3、实验室安全防护;4、显微镜;5、用于EQA的玻片保存情况;6、玻片、染色和镜检;7、现场复检 A. 现场评价时督导员至少要随机抽查3张阳性玻片;AFB(＋)玻片质量评估图例(1);复红染色不充分镜下表现;脱色不充分镜下表现(1);脱色不充分镜下表现(2);脱色不充分镜下表现(3);脱色时间过长镜下表现;复染时间过长镜下表现;复检样本量计算表;复检样本量计算表说明： ;复检结果评价;1.误差分类：分为定性误差和定量误差 （1）定性误差包括高假阳性和高假阴性 高假阳性（High False Positive HFP）：阴性片被错误地判读为2＋以上的阳性。 高假阴性（High False Negative HFN）：2＋以上的阳性玻片被错误地判读为阴性。;（2）定量误差包括量化误差、低假阳性和低假阴