分子生物学-第9章-原核生物基因表达调控.ppt

Molecular Biology Course;教学要求;第1节 基因表达调控的基本概念;第1节 基因表达调控的基本概念; 组成性表达(constitutive expression) 适应性表达(adaptive expression）; 2、适应性表达 指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。 应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导(induction)，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)； 相反，随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏(repression)，相应的基因被称为可阻遏的基因(repressible gene)。 ;三、基因表达的规律 ——时间性和空间性;;2、空间特异性(spatial specificity);四、基因表达调控的生物学意义;五、 基因表达调控的基本原理;（二）基因转录激活调节基本要素; ;操纵子;Structural genes(结构基因) ：用于表达参与特异生化合成途径所需的酶。 Control elements (调控元件)：调节结构基因转录的一段DNA序列，包括启动子、操纵基因等。 Regulator gene(s)(调节基因) ：编码合成那些参与基因表达调控的RNA和蛋白质的特异DNA序列。 ;Control element; 操纵子 调节基因 启动序列 操纵序列 编码序列（结构基因） 表达 转录 ; R ;2．反式作用因子（trans-acting factor） ;1) 原核生物的反式作用因子（3类） 特异因子 决定RNA聚合酶对启动序列的特异识别和结合能力； (如RNA聚合酶的 ?因子) 阻遏蛋白 通过与操纵序列结合，阻遏基因转录，发挥负性调控作用； （由调节基因表达的阻遏蛋白） 激活蛋白 与启动子上游DNA序列结合，促进RNA聚合酶转录活性，发 挥正性调控作用。（如，CAP—分解代谢物基因活化蛋白）; 2)真核生物的反式作用因子 真核生物中的反式作用因子通常称为转录因子 按其功能不同，常有以下三类： 基本转录因子 转录调节因子 共调节因子 ;3. RNA聚合酶 1. 启动子碱基序列变化影响RNA聚合酶活性 （尤其－10区和－35区的共有碱基序列变化） 2. 调节蛋白构象变化影响RNA聚合酶活性 ;第2节 The Lac operon 乳糖操纵子;一、乳糖操纵子的结构;The lac operon;一、乳糖操纵元的结构;一、乳糖操纵子的结构;lacI;lacY;G2: The LAC operon;以+11为对称轴，每边为两段各6bp反向重复序列; 3. 乳糖阻抑物;乳糖操纵元的双调控系统： (1)受乳糖与阻遏蛋白调控的、可诱导的负调控系统; (2)受cAMP与CAP调节的、可诱导的正调控系统。葡萄糖通过调节cAMP的合成间接监控这一过程。 以此保证大肠杆菌灵活、经济、有效地适应外界环境，只有在必需的时候（只有乳糖，没有葡萄糖）才启动乳糖操纵子的表达。;二、乳糖操纵子的调节机制; 2. Induction 诱导; 诱导物和结合于操纵基因上的阻遏物结合，使其从操纵基因上释放。而不是和游离阻遏物结合，影响阻遏物和DNA结合的平衡 ; 诱导物改变阻遏蛋白在DNA上的分布，而不是产生游离阻遏蛋白： 随机DNA序列和阻遏蛋白也具有亲和力，但比操纵基因和阻遏蛋白的亲和力低107倍 诱导物和阻遏蛋白结合时，阻遏蛋白和操纵基因的亲和力下降，所有阻遏蛋白结合在DNA的随机序列上 除去诱导物后，阻遏蛋白恢复活性，从随机位点直接转移到操纵基因上;i;Lactose (allolactose) ：天然的诱导物 IPTG(异丙基-b-D-硫代半乳糖苷), 人工合成的诱导物，, 能快速激活乳糖操纵子结构基因的转录，但自身不被分解(义务诱导物) IPTG is used to induce the expression of the cloned gene from LacZ promoter in many vectors, such as pUC19.;Ampr;;可诱导调控的操纵元，其基因表达产物都是利用某种营养物的酶体系（分解代谢） ??? 有营养物 ——相应基因开放 ??? 无营养物 ——细胞就