分子生物学第8章基因的表达与调控(下)—真核基因表达调控一般规律 msmPPT.ppt

两种G蛋白的活性型和非活性型的互变 霍乱毒素能催化ADP核糖基共价结合到Gs的α亚基上，致使α亚基丧失GTP酶的活性，结果GTP永久结合在Gs的α亚基上，使α亚基处于持续活化状态，腺苷酸环化酶永久性活化。导致霍乱病患者细胞内Na+和水持续外流，产生严重腹泻而脱水。 2、胞内受体 高度可变区 位于N端，具有转录活性 DNA结合区 含有锌指结构 激素结合区 位于C端，结合激素、热休克蛋白，使受体二聚化，激活转录 配体：类固醇激素、甲状腺素等 功 能：多为反式作用因子，当与相应配体结合后，能与DNA的顺式作用元件结合，调节基因转录。 真核细胞跨膜信号传导途径 受体分子活化细胞功能的途径： 　　　1.受体/受体结合蛋白具有内源蛋白激酶活性 　　　2.配体与细胞表面受体结合，通过G蛋白介导 蛋白激酶（PK）分类： 　根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸殘基种类分： 　　（1）丝氨酸/苏氨酸型 　　（2）酪氨酸型 　　（3）组氨酸型 　　 根据是否有调节物参与蛋白激酶活性分： 　　（1）信使依赖型 　　（2）非信使依赖型　　　 依赖于cAMP的蛋白激酶称为A激酶（PKA），它能把ATP分子上的末端磷酸基团加到某个特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上。 被A激酶磷酸化的氨基酸N端上游往往存在两个或两个以上碱性氨基酸（X-Arg-Arg-X-Ser-X） ，特定氨基酸的磷酸化，改变了这一蛋白的酶活性。 在不同的细胞中，A激酶的反应底物不一样，所以，cAMP能在不同靶细胞中诱发不同的反应。 1. 受cAMP水平调控的A激酶 非活性状态的PKA全酶由4个亚基R2C2所组成，分子量约为150-170，调节亚基与cAMP相结合，引起构象变化并释放催化亚基，后者随即成为有催化活性的单体. cAMP调控的A激酶活性 PKA 不同细胞对cAMP信号途径的反应速度不同： 在肌肉细胞1秒钟之内可启动糖原降解为葡糖1-磷酸（图），而抑制糖原的合成。 cAMP活化糖原磷酸化酶示意图 Glycogen breakdown in skeletal muscle 肾上腺素＋受体 肾上腺素—受体 Gs Gsa βγ ACi ACa ATP cAMP cAMP ⊕ PKA 磷酸化酶激酶b 磷酸化酶激酶a ATP 磷酸化酶b 磷酸化酶a 磷蛋白磷酸酶 抑制物Ia 抑制物Ib 磷蛋白 磷酸酶 Pi PKA cAMP ⊕ ⊕ ATP Pi H2O 磷蛋白 磷酸酶 Pi Ca2+ ⊕ ⊕ AMP G ATP ATP PKA 糖原合成酶a 糖原合成酶b ATP 受cAMP调控的基因中，在其转录调控区有一共同的DNA序列(TGACGTCA)，称为cAMP应答元件(cAMP response element , CRE)。 可与cAMP应答元件结合蛋白 (cAMP response element bound protein,CREB)相互作用而调节此基因的转录。 cAMP介导的转录因子磷酸化对基因表达的调节作用 cAMP 激活PKA 活化的PKA 进入细胞核 CREB (Ser Thr) 磷酸化 CREB形成 同源二聚体 与DNA的 CRE结合 激活受CRE 调控的基因 cAMP-PKA调控基因表达机制： cAMP信号与基因表达 cAMP-PKA信号途径的信息传递过程： 激素→G蛋白耦联受体→G蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→依赖cAMP的蛋白激酶A→基因调控蛋白磷酸化→基因活化转录。 激素→G蛋白耦联受体→G蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→依赖cAMP的蛋白激酶A→底物蛋白磷酸化→代谢调控作用（生物学效应）。 促进糖原分解 抑制糖原合成 促进脂肪动员 2. C激酶与PIP2、IP3和DAG （Ca2+磷脂依赖性蛋白激酶途径） 该蛋白激酶活性是依赖于Ca2+的，故称C激酶（PKC）。 ①第二信使 三磷酸肌醇(肌醇-1,4,5三磷酸，IP3) 二脂酰甘油(DAG) ②激活蛋白激酶C(protein kinase C, PKC) 免疫球蛋白重链基因片段重排与组织特异性表达 8.3.2 DNA甲基化与基因活性的调控 DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一， DNA的甲基化修饰现象广泛存在于多种有机体中。 与基因表达调控密切相关。大量研究表明，DNA甲基化关闭某些基因的活性，去甲基化诱导基因的重新活化和表达。 1、DNA的甲基化 DNA甲基化能引起