第四章_核酸操作的基本原理课件.pptVIP

3、DNA分子的构象 SCOL,L 4、电源电压  在低电压(5v/cm)时, 迁移速率与电压成正比 5、嵌入染料 溴化乙啶使线状DNA迁移率降低15％。 6、 离子强度影响 pH 影响DNA分子所带的电荷 (TAE TBE) 二、琼脂糖变性胶电泳 未变性的RNA，电泳时与电泳迁移率没有严格的相关性 在变性条件下电泳，才能使RNA移动距离与其相对分子量对数成正比。 RNA变性剂有二种，乙二醛-二甲基亚砜（DMSO） 甲醛 三.聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 第四章 核酸操作的基本技术 第一节 核酸的提取与纯化 制取核酸样品的根本要求是保持核酸的完整性 防止核酸酶对核酸的降解、变性或破坏 一、DNA提取的基本原理与方法 （一）DNA提取的基本原理 DNA是极性化合物，溶于水不溶于乙醇、 氯仿等有机溶剂 DNA多以脱氧核蛋白（DNP)形式存在 提取DNA时用先将DNP抽提出来，在将DNA 分离出来 （二）基本步骤 破碎细胞并对DNA快速实施保护 破壁： 变性: 复性: 将核酸从其它大分子中分离出来 使核酸和蛋白质的复合体解离 1.液氮研磨 2.快速加入提取缓冲液 1.离子变性剂、去污剂 2.酚、氯仿 1.无水乙醇 2.异戊醇 （二）、DNA提取的