於松达-黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响1.pptVIP

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於松达-黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响1

黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响 舟山医院内分泌风湿科 2013-04-20 於松达 徐翔峰 徐佶 2013年浙江省风湿病学术年会 研究背景 膝骨关节炎是一种最常见的慢性、进行性关节疾病,是以关节软骨退变为主要病理基础 通过手术获得退变软骨标本是临床上最为便利、且最符合医学伦理学要求的一种取材方法,将可能成为研究软骨退变机制及筛选有效防治药物的最捷径平台 黄芪甲苷为黄芪的主要单体成分,目前药理学研究认为具有增强机体免疫力、提高抗病能力、抗应激、促生长、抗炎、镇痛等作用 研究背景 胶原是软骨组织中主要的大分子物质,为软骨组织提供刚性支撑框架,蛋白多糖( 主要成分为ACAN )通过与水的结合而具有黏弹性,可对抗压力,分散和吸收负荷,从而共同构成了软骨组织独特的组织结构和力学特性 在软骨组织退变过程中,ADAMTS-5为ACAN的主要降解酶 研究目的 探索膝骨关节炎患者退变软骨组织的原代细胞培养、传代及鉴定方法,观察其形态特征变化,为开展软骨细胞退变机制及筛选有效防治药物提供基础 观察黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞增值及ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响 细胞培养方法 标本离体1小时内无菌PBS冲洗2遍 剪碎至约为0.3mm×0.3mm×0.3mm 采用胶原酶和胰酶进行消化 10%FBS的DMEM培养基 培养基适量,避免组织块漂浮 5%CO2、37℃细胞培养箱 膝关节软骨组织块原代细胞培养 ×200 第7~9天 2周 正 常 对 照 第5~7天 2周 退 变 患 者 ×100 ×100

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