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於松达-黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响1
黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响
舟山医院内分泌风湿科
2013-04-20
於松达 徐翔峰 徐佶
2013年浙江省风湿病学术年会
研究背景
膝骨关节炎是一种最常见的慢性、进行性关节疾病,是以关节软骨退变为主要病理基础
通过手术获得退变软骨标本是临床上最为便利、且最符合医学伦理学要求的一种取材方法,将可能成为研究软骨退变机制及筛选有效防治药物的最捷径平台
黄芪甲苷为黄芪的主要单体成分,目前药理学研究认为具有增强机体免疫力、提高抗病能力、抗应激、促生长、抗炎、镇痛等作用
研究背景
胶原是软骨组织中主要的大分子物质,为软骨组织提供刚性支撑框架,蛋白多糖( 主要成分为ACAN )通过与水的结合而具有黏弹性,可对抗压力,分散和吸收负荷,从而共同构成了软骨组织独特的组织结构和力学特性
在软骨组织退变过程中,ADAMTS-5为ACAN的主要降解酶
研究目的
探索膝骨关节炎患者退变软骨组织的原代细胞培养、传代及鉴定方法,观察其形态特征变化,为开展软骨细胞退变机制及筛选有效防治药物提供基础
观察黄芪甲苷对膝骨关节炎患者退变软骨细胞增值及ACAN、ADAMTS-5 mRNA表达的影响
细胞培养方法
标本离体1小时内无菌PBS冲洗2遍
剪碎至约为0.3mm×0.3mm×0.3mm
采用胶原酶和胰酶进行消化
10%FBS的DMEM培养基
培养基适量,避免组织块漂浮
5%CO2、37℃细胞培养箱
膝关节软骨组织块原代细胞培养
×200
第7~9天
2周
正
常
对
照
第5~7天
2周
退
变
患
者
×100
×100
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