江南大学代谢控制发酵育种的基本技术 - 副本PPT
第三章 代谢控制发酵育种的基本技术生命科学学院胡庆森;3.1 序言;3.1微生物育种技术的发展历史:; 诱变育种是发酵工业育种的重要手段和技术,目前几乎所有工业生产菌种都经过诱变处理。;3.2 代谢控制育种的意义和现状;3.2 诱变育种的原理和诱变剂;3.2.1 诱变育种的原理;1. 出发菌株的选择;诱变剂一般可以分为物理诱变剂和化学诱变剂;常见的诱变剂种类及其作用原理;①紫外线诱变:
特点:危险性小,对野生菌株 诱变效果好,应用最为广泛
机制:形成胸腺嘧啶二聚体改变DNA生物活性。
操作要点: 260 nm波长照射菌悬液或孢子悬浮液,紫外灯功率15 W,距离固定在15 cm-30 cm左右。
;光复活作用(photoreactivation);②亚硝基胍(NTG)诱变:
特点:可诱发营养缺陷型突变,有超诱变剂的称号。
较难溶解于缓冲液(甲酰胺溶解),毒性较大。
不同的pH环境,诱变效果通常差异较大
磷酸缓冲液 中性 NTG对DNA起作用
Tris-HCl缓冲液 酸性 HNO2对DNA起作用
操作要点:
通常浓度0.1-1 mg/mL,3
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