皮肤鳞状细胞癌中PCNA和PTEN表达与临床病理特征关系.docVIP

皮肤鳞状细胞癌中PCNA和PTEN表达与临床病理特征关系 　　[摘要]目的：探讨PCNA和PTEN在皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达情况，研究其表达与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化SP法检测52例皮肤鳞状细胞癌组织和10例正常皮肤组织石蜡标本中PCNA和PTEN蛋白的表达。结果：在SCC标本中，PCNA蛋白阳性表达率明显高于正常皮肤组织，PTEN蛋白阳性表达率明显低于正常皮肤组织（P 　　[关键词]癌；鳞状细胞；PCNA；PTEN；免疫组化 　　[中图分类号]R739.5 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2012）06-0936-03 　　PCNA是一种细胞增殖相关核抗原，在细胞周期调节过程中起重要作用，在增殖细胞和高度恶性肿瘤中表达增强；PTEN是迄今发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，主要通过脱磷酸化作用调控细胞内信号传导通路，从而调节细胞的生长、发育及抑制肿瘤增殖、粘附、转移。本研究采用免疫组化SP法检测皮肤鳞状细胞癌组织和正常皮肤组织石蜡标本中PCNA和PTEN蛋白的表达情况，试图探讨其表达与临床病理特征的关系。 　　1 资料和方法 　　1.1 一般资料：收集本院皮肤科和病理科于2005年1月～2011年12月手术切除的76例疑似鳞状细胞癌组织标本，病历资料完整和病理诊断明确的52例。男23例，女29例；年龄41～80岁，平均65.2±2.1岁，病程3个月～11年（平均1.3±0.4年）。按Broders病理分级法将其分为：Ⅰ级12例，Ⅱ级15例，Ⅲ级14例，Ⅳ级11例。Ⅰ级为高分化鳞癌，Ⅱ级为中分化鳞癌，Ⅲ级～Ⅳ级为低分化鳞癌。另选取10例皮肤外科手术室切除的正常皮肤组织标本作为对照组，男4例，女6例。 　　1.2 方法 　　1.2.1 主要试剂：鼠抗人PCNA单克隆抗体（克隆号PC10）与PTEN单克隆抗体（克隆号28H6）和SP免疫组化试剂盒（浓缩型）均购自北京中山生物技术开发有限公司。 　　1.2.2 实验方法：采用免疫组化SP法，实验步骤严格按照试剂盒说明书进行，用PBS液代替一抗作阴性对照，用已知的阳性切片作阳性对照。 　　1.2.3结果判定：由2位病理科医师和1位皮肤科病理医师共同评判。标准如下：①PCNA与PTEN根据着色强弱，染色强弱以多数细胞的呈色反应为准：不着色为0分，浅黄色为1分，深黄色为2分，棕黄色为3分；②低倍镜下选取细胞???布均匀的视野，高倍镜视野下用HMIAS高清晰病理彩色图像分析系统进行图像分析，每张切片在×40高倍镜下随机选取5个视野，每个视野计数100个细胞，计数阳性细胞数所占的百分比均值：50%为3分。根据上述两项的记分之和将PCNA和PTEN蛋白阳性结果分为4级：阴性（-）为＜2分，弱阳性（+）为＜3分，阳性（2+）为3～4分，强阳性（3+）为＞4分。 　　1.3 统计学处理：用SPSS13.0软件，计数资料采用卡方检验、Fisher确切概率法，组间比较采用单因素方差分析，用直线相关分析计算相关系数，并判定其相关程度。P0.05）。PTEN在不同病理分级间表达也有统计学差异（P 　　3 讨论 　　近年来研究表明，恶性肿瘤的发生、发展和浸润与多种癌基因强表达和抑癌基因低表达或失表达密切相关,是一种多基因、多因素相关性疾病。侵袭和转移是恶性肿瘤的重要特性，是影响预后的重要因素，寻找有价值的预测预后及指导临床治疗的生物学指标已成为肿瘤研究的新热点。 　　PCNA是 DNA复制时所必需的调节蛋白，是与细胞增殖周期有关的周期蛋白，在 DNA 复制及细胞分裂过程中不可或缺。其表达在 G1期开始增高，S期达到高峰，G2期和 M期明显下降[1]。PCNA 的阳性程度可直接反应出 DNA 复制的活跃程度[2-3]。本研究结果显示，在正常组织中，PCNA 的表达较低；高中分化组阳性率与低分化组阳性率之间有显著性差异，与Yamazaki[4]等的研究结果相似。随着SCC的病理分级增高，PCNA 的表达明显增强。提示 PCNA 可促进细胞增殖，并加速肿瘤恶变。本研究结果也显示，在SCC中PCNA与PTEN的表达呈明显负相关，提示二者之间可能以负反馈调节方式参与SCC的发生发展。 　　PTEN是继p53基因后被发现的一种能识别肿瘤的抑制基因，在细胞的生长、凋亡、黏附、迁移和浸润等方面有重要作用。PTEN蛋白失表达与一些恶性肿瘤的生物学行为和预后密切相关，阳性表达者多分化好、浸润较浅、不伴淋巴结转移和预后良好[5-7]。大量研究证明，PTEN 蛋白在多种肿瘤中表达下调，且表达的水平与肿瘤的恶性程度呈负相关，说明PTEN 与多种恶性肿瘤如：胃癌、宫颈癌、间皮瘤等的发生、发展密切相关[8-9]。本研究结果显示，PTEN 在正常组织中表达率远高于SC