2017电脑dna重组技术的基本工具ppt课件.pptVIP

生物 选修3现代生物科技专题 目 录 专题1 基因工程 专题2 细胞工程 专题3 胚胎工程 专题4 生物技术的安全性和伦理问题 专题5 生态工程 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 基因工程的概念 基因工程又叫做 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加 以 ，然后放到另一种生物的细胞里， 改造生物的遗传性状。 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 基因工程名称 基因拼接技术或DNA重组技术 实质:基因重组 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 “剪切”“拼接”“导入”“表达” 结果 人类需要的基因产物 基因工程的概念 蓝色素基因 三色紫罗兰 玫瑰 导入 目的基因 受体细胞 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 基因的剪刀——限制酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 1.1 DNA重组技术的基本工具 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 G P A P 限制性内切酶作用过程 点击播放 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。 限制酶 EcoRⅠ能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端。 SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。 基因的针线──DNA连接酶 切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶？ 二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶 1、种类： 2、作用部位： 两类 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 E.coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 DNA聚合酶与DNA连接酶 相同 区别 DNA聚合酶 DNA连接酶 在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来 将两个DNA片段连接起来； 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来 形成磷酸二酯键 基因进入受体细胞的载体 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 3、载体——“分子运输车” （1）载体的作用 将 转移到受体细胞中去。 目的基因 （2）常用的载体 细菌细胞质的质粒 λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 1、通常以质粒作为载体 质粒——细菌细胞中一种很小的双链环状DNA分子。 裸露的、结构简单、独立于细菌之外，并且有自我复制能力 氨苄青霉素抗性基因 质粒 拟核 大肠杆菌细胞 目的基因插入位点 复制原点 三、 “分子运输车” —基因进入受体细胞的载体： 作为载体的必要条件 1 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 2 具有多个限制酶切点以便与目的基因连接 3 具有某些标记基因 4 对受体细胞无害 5