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实验诊断学 主要内容 第八章 前言 第一节 血清免疫球蛋白检测 一、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)的概念 免疫球蛋白是指具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白,由浆细胞产生,存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上,具有特异性识别抗原的功能,且必须与抗原结合后才能启动效应功能。 (二)异常血清免疫球蛋白: 无抗体活性 M蛋白(M protein)的概念:也称单克隆免疫球蛋白,是由单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 血清中检测到M蛋白即为单克隆性免疫球蛋白增殖病,如多发性骨髓瘤(MM,IgG型最常见)、巨球蛋白血症(IgM型)、重链病、轻链病、半分子病、恶性淋巴瘤、良性M蛋白血症等。 第二节 血清补体检测 一、总补体溶血活性(CH50)检测 主要反映补体经典途径(C1-C9)的综合水平。 使用溶血活性检测法,检测终点为50%溶血(CH50)。 增高见于急性炎症和某些恶性肿瘤等;减低见于各种免疫复合物性疾病等。 第三节 细胞免疫检测 二、B细胞分化抗原检测 检测标志:CD19、CD20、CD22等。 临床意义:升高见于急、慢性B细胞型淋巴细胞白血病和Burkitt淋巴瘤等;降低见于无丙种球蛋白血症、使用免疫抑制剂等。 三、自然杀伤性(NK)细胞检测 NK细胞是不同于T、B细胞的异质性、多功能细胞群,介导天然免疫,能直接杀伤靶细胞,不依赖抗体和补体。 检测意义:NK细胞的活性是判断机体抗肿瘤、抗病毒感染的重要指标之一。对于肿瘤、病毒感染者、移植排斥反应者可检测NK细胞活性,指导临床诊治。 NK细胞活性:减低见于血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染等;升高见于宿主抗移植物反应。 抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC):由细胞表面的抗体Fc受体介导。 四、细胞因子(cytokine,CK)检测 概念:细胞因子是一类由免疫细胞和相关细胞产生的调节细胞功能的高活性、多功能、低分子的分泌性蛋白质,属于微量免疫调节因子。 常见种类介绍: (1)白细胞介素-2(IL-2):主要由活化T细胞产生,具有促进淋巴细胞生长,增殖,分化作用,增高见于自身免疫性疾病、排斥反应等,降低见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、某些病毒感染等。 (2)肿瘤坏死因子(TNF) :由单核细胞、吞噬细胞、T细胞产生,可引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用,还可引起抗感染的炎症反应,对免疫细胞有调节、诱生作用,其结构分TNFa和TNFβ两型,但生物活性类似 。 (3)干扰素(IFN):是宿主细胞受病毒感染后产生的一种非特异性防御因子,具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、控制细胞增殖的作用,增高见于SLE、非活动性类风关、急性病毒感染等;减低见于乙型肝炎、哮喘、活动性类风关、使用免疫抑制剂等。 思考题1: 1.何谓M蛋白、NK细胞、CK? 2.检测免疫球蛋白有何临床意义? 3. T细胞分化抗原CD3、CD4和CD8检测的临床意义? 思考题2: 评估机体体液免疫状态的实验指标有那些? ①血清蛋白电泳可以初步从α、β、γ球蛋白的相对含量判断是否有严重的体液免疫缺陷,或者发现异常的球蛋白(如M蛋白等); ②血清免疫球蛋白(1gG、A、M、E)定量测定可以判断体液免疫的功能状态; ③B细胞数量的检测可以判断体液免疫缺陷或增殖等。 思考题3: 评估机体细胞免疫状态的实验指标有那些? ①血常规及淋巴细胞计数可以初步判断白细胞,淋巴细胞的相对数量的多少; ②T细胞数量的检测可以判断细胞免疫降低或升高等状态; ③T细胞功能检测(如T细胞转化试验)能反映细胞免疫的功能状态。 第四节 肿瘤标志物检测 三、肿瘤标志物主要检测方法: 放射免疫法(RIA) 化学发光免疫测定(CLIA) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 蛋白芯片技术(protein microarray) 11.神经元特异性烯醇化酶(NSE):在糖酵解途径中催化甘油分解的酶,与神经内分泌起源的肿瘤有关,是神经母细胞瘤(90%)、小细胞肺癌的高特异性和高灵敏度的标志物。 12.铁蛋白(Ferritin):肝是合成铁蛋白的主要场所,增高见于急性粒细胞白血病,肝肿瘤,胰腺癌,成人斯蒂尔病等;降低见于镰刀细胞瘤,恶性肿瘤等。 13.人绒毛膜促性腺激素β链(β- HCG):恶性葡萄胎,绒毛膜上皮癌,男性睾丸畸胎瘤等恶性肿瘤。 14.人生长激素(HGH):由腺垂体细胞分泌,见于垂体瘤(肢端肥大和巨人症)。 五、肿瘤标志物的选用原则 同一种肿瘤可含多种标志物,而一种标志物可出现在多种肿瘤。 为提高肿瘤诊断的阳性率应选择特异性标志物或最佳组合。 动态检测有利于鉴别良、恶性肿瘤,也有利于肿瘤的复发、转移和预后
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