一株溶血性蜡状芽孢杆菌wh2015全基因组测序分析及其溶血基因筛选 广东海洋大学.pdfVIP

1 一株溶血性蜡状芽孢杆菌WH205全基因组测序分析及 其溶血基因筛选 摘要 蜡状芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌，能形成孢子，在食品中分布广泛，如大米， 鸡蛋，调味料，肉，奶制品，甚至在药物中也有。在许多国家，包括美国，加拿大和 荷兰，由蜡状芽孢杆菌引起的，较为严重的食物中毒事件早已有报道，中毒者表现出 呕吐、腹泻症状。 本研究中，从养殖大菱鲆体表溃烂处分离到一株溶血性细菌，而大菱鲆目前已成 为在中国的海水养殖鱼类中主要品种之一，年产量超过6万吨，在大菱鲆养殖业的快 速发展过程中，鱼病的发生是一个严重的问题，许多的病原菌都能引起宿主败血症， 此分离菌株可能是某一致病菌，因此我们对此溶血性细菌进行以下研究： 1．经形态学鉴定和系统发育学分析，分离菌株聚集于蜡状芽孢杆菌。根据其分离 的时间和地点，被命名为蜡状芽孢杆菌WH2015。 2．血平板溶血试验证实WH2015菌株能够裂解羊红细胞，电子扫描电镜分析也证 实蜡状芽孢杆菌WH2015对血细胞具有一定的损伤能力。 Mb， 3．对蜡状芽孢杆菌WH2015基因组测序和分析的结果显示其基因组大小为5．8 平均G卜卜C含量为35％，有6568个基因，98条tRNA序列。与其它蜡状芽孢杆菌株 系进行比较基因组分析显示，WH2015菌株基因组几乎拥有所有的核心溶血性基因， 机理与其它报导过的蜡状芽孢杆菌株系的溶血机理相似。 4．为验证溶血基因的功能，本文还成功构建原核表达质粒pET-28a—hblC、 表达获得目的基因的重组蛋白，为下一步溶血基因的表达及其功能研究奠定了抗实的 基础。 本研究在分离鉴定养殖大菱鲆体表溶血性蜡状芽胞杆菌WH2015的基础上，对其基 因组进行了测序和分析并鉴定了其所具有的的致病性基因和毒力因子，帮助我们理解 由蜡状芽孢杆菌引起的养殖大菱鲆疾病，以及为其防治措施的实施和疾病的治疗提供 可靠的理论基础。 关键词：养殖大菱鲆病原体，蜡状芽孢杆菌WH2015，溶血反应，基因组，原核表达 万方数据 Genome ofa Bacilluscereusand Hemolytic Analysis Screenits Genes Hemolysis Abstract befound cereusisa and bacteriumwhichcan Bacillus Gram—positivespore—forming the food in andevendrugs．Severe products foods，ricedishes，eggs，spices，meat，dairy with and been tobecausedtheB．cereus accidentshave reported by vomiting poisoning