专题八 第1讲PPT
【解析】选C。离体的植物组织在一定的培养条件下,先脱分化形成植物的愈伤组织,然后再分化出根和芽,形成完整的小植株。而分化出根和芽的过程属于再分化。 热点考向 5 动物细胞工程? 【典例5】动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息获得的结论,不正确的是( ) A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B.有无血清对正常细胞培养的影响不同 C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养 D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大 【解题探究】 (1)曲线分析。 ①若研究有无血清对癌细胞培养的影响,应分析哪两条曲线? ②若研究有无血清对正常细胞培养的影响,应分析哪两条曲线? ③若研究无血清对正常细胞与癌细胞的影响,应分析哪两条曲线? 提示:①A、B两条曲线。 ②C、D两条曲线。 ③B、D两条曲线。 (2)正常细胞与癌细胞的区别。 ①癌细胞中数目较多的细胞器: 。 ②癌细胞能无限增殖的原因: 。 提示:①线粒体、核糖体 ②癌细胞表面糖蛋白减少,无接触抑制现象 【解析】选A。动物细胞培养时通常要在培养基中加入血清、血浆等物质。从图示中可看出癌细胞与正常细胞的增殖速率不同。有血清时正常细胞增殖快,而有无血清对癌细胞的培养影响不大。 热点考向 2 基因工程的操作步骤? 【典例2】肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。 (1)进行过程①时,需要用到 等工具酶。 (2)研究发现,let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取 进行分子杂交,以直接检测1et-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中 (RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。 (3)进行过程②时,需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于细胞培养。③过程常用的方法是 。 【解题探究】 (1)反转录法合成目的基因的条件。 ①需要的酶: ;②模板: ; ③原料: 。 提示:①反转录酶 ②mRNA ③脱氧核苷酸 (2)目的基因的检测与鉴定。 ①检测目的基因是否导入受体细胞的方法:? 。 ②检测目的基因是否转录所使用的基因探针是什么? 提示:①DNA分子杂交技术 ②基因探针为放射性同位素或荧光标记的目的基因单链。 【解析】(1)构建重组载体时,应用限制性核酸内切酶切开载体并插入目的基因,再用DNA连接酶连接为重组载体。 (2)检测目的基因是否转录,可以从细胞中提取miRNA,与基因探针进行分子杂交。let-7基因表达增强,会使RAS蛋白翻译受阻,RAS蛋白含量减少,使肺癌细胞增殖受到抑制。 (3)进行细胞培养时,需要用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞。将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。 答案:(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 (2)miRNA RAS蛋白 (3)胰蛋白 显微注射法 【总结提升】目的基因的检测与鉴定方法 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分 子 水 平 检 测 第 一 步 目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上 DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间) 受体DNA是否和基因探针结合 第 二 步 目的基因是否转录出mRNA 分子杂交技术(DNA和mRNA之间杂交) 受体mRNA是否和基因探针结合 第 三 步 目的基因是否翻译成蛋白质 抗原-抗体杂交 是否出现杂交带 个体生物学水 平鉴定 直接检测转基因生物是否具有目的基因控制的性状 【变式训练】(2013·南通模拟)科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中,不合理的是( ) A.利用小鼠DNA分子通过PCR技术克隆出β-珠蛋白基因的编码序列 B.用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体 C.用Ca2+处理大肠杆菌后,将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中 D.用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌 【解析】选C。本题考查基因工程的基本操作程序中的相关知识。通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白的实验中,可通过PCR技术从小鼠的DNA分子中获取目的基因,构建表达载体后,导入大肠杆菌。因为实验以抗四环素基因为标记基因,如果受体大肠杆菌本身就具有四环素抗性,将无法检测大肠杆菌是否获取目的基因。 热点考向 3 基因工程的应用? 【
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