人教版选修3第1章第1节DNA重组技术的基本工具(共47张PPT)PPT.ppt

两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， 注意：DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口，但不能连接单链DNA！ DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 DNA连接酶的缝合作用 DNA聚合酶 DNA连接酶 区别1 区别2 相同点 寻根问底 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 2)以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链 2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板 限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？ 可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） 小试身手 * 【应城一中生物】 【应城一中生物】 * 基因工程 专题1 烟草 　据WTO调查：2004年全世界因狂犬病致死人数约5.5万人 　中国卫生部通报：2004年７月，狂犬病列法定报告传染病死亡数之首。发病死亡率近100% 能产生狂犬病抗体蛋白的转基因 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。 　　1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。 治疗糖尿病特效药—— 据WTO调查： 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人，我国约6000万。 胰岛素 思考：转基因技术实现了一种生物的某些性状 在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关？ 密码子在生物界是　　　的！ DNA(基因)　　　mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 通用 定向基因改造设想 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 基因工程的产物 基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的新生物类型和产品 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 早期基础理论 1859年达尔文提出生物进化论 1900年孟德尔基因分离定律和自由组合定律的再度提出 早期基础理论 1910年摩尔根证明基因在染色体上，并提出基因的连锁互换定律 早期基础理论 1944年艾弗里证明DNA是遗传物质 DNA可从一种生物个体转移到另一种生物个体 后期基础理论 1953年沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型 后期基础理论 1958年梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制 后期基础理论 1958年克里克等提出中心法则 后期基础理论 转录 翻译 逆转录 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的 遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。 后期基础理论 技术发明 1967年基因转移载体的发现 1970年工具酶的发现 1965年氨基酸测序和1977年DNA测序技术的发明 1972年DNA体外重组的实现 1973年重组DNA表达实验的成功 1980年第一例转基因动物和1983年第一例转基因 植物问世 1988年PCR技术的发明 专题一 基因工程(gene engineering) 1.1 DNA重组技术的基本工具 棉花细胞 (不能抗虫) 抗虫基因 转基因抗虫棉 (能抗虫) 苏云金芽孢杆菌 与运载体DNA拼接 项 目 内 容 来源 种类及命名 识别序列数目 作用特点 作用结果 主要来源于原核生物 命名：属名头字母（大写）+种名头2字母 +菌株名（通常省略）+罗马数字 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列， 并在特定的位点切割DNA分子。 大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成 少数的识别序列由 个核苷酸组成 6 4、5或8 产生黏性末端或平末端 种类：现已从300微生物中分离出约4000种限制酶 作用 1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 2、在特定序列的特定位点上切割DNA 断开两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 一、基因工程的基本工具 1、限制（性核酸内切）酶 1’ 2’ 3’