免疫学技术-免疫血清制备PPT.pptVIP

抗体制备;一、免疫动物;动物选择;抗原及抗原剂量的选择：所用抗原应具备抗原特异性和较高的纯度。而且可被降解 抗原剂量根据其种类、免疫次数、注射途径及动物种类、免疫周期等不同。 抗原剂量过低或过高均不能诱导产生抗体 在一定范围内，抗体效价随注射抗原剂量而增高;抗原溶液最好为中性生理学缓冲液（如PBS） 从丙烯酰胺凝胶中纯化抗原：电泳后蛋白定位、制备凝胶碎片（对于大动物）、电洗脱凝胶、转膜（硝酸纤维素膜）后超声 半抗原：交联载体（BSA，KLH，蓝载体） 多肽抗原：肽长度、合成难度，肽的活动性。最安全的选择是制备多个不同区域的10-15个氨基酸的合成肽。偶联策略;三、佐剂的应用;四、注射途径;五、加强免疫;用于小鼠的免疫原推荐剂量、免疫方式;六、免疫效果评价;单克隆抗体制备;七、抗体纯化;;免疫亲和层析法： （1）用抗原免疫亲和柱纯化：对多克隆血清，纯化特异性抗体唯一方法 （2）用抗Ig免疫亲和柱纯化抗体：分离大鼠单克隆抗体;八、抗体的保存;九、抗体的应用