原代培养定稿PPT.ppt

细胞原代培养(Cell primary culture);实验目的 ;实验原理;组织块培养法;消化培养法; 超净台;滤 器;滤器工作原理; CO2培养箱;超净台;自动双重纯水蒸馏器 纯水仪;培 养 板; 培养瓶;实验材料;实验试剂 ;实验步骤 ;实验步骤 ;方法与步骤;（3）消化及分散组织块：将上述清洗过的组织放入离心管内，加入5～6倍量的0.25％胰蛋白酶液（pH7.4 ～ 7.6），置37℃水浴中消化20 ～ 30min，每隔10min摇动一次，直到组织块变得疏松，粘稠，且颜色略变为白色为止。取出离心管，在超净台中吸去胰蛋白酶液，加入5ml培养液，用吸管反复吹打组织块，使其分散成细胞悬液，取上清液至另一离心管中。;（4）观察与计数：从细胞悬液中取出1ml滴于载玻片上，显微镜下观察细胞的数目。看到球型的细胞，证明消化下来细胞，实验成功。 ;;;;;;基本操作技术和要求