基因工程第一章概述PPT.ppt

4. 限制酶前面要带上R（Restriction)， 修饰酶前面要带上M（Modification）。（现已省略）。 2. 用一个右下标的大写字母表示菌株或型。如Ecok, EcoR（现在都写成平行，如EcoR I）。 3. 如果一种特殊的寄主菌内有几种不同的限制与修复系统，用罗马字母表示。如EcoR I，EcoR V。 限制性核酸内切酶的命名 属名 种名 株名 H i n d III H i n d III Haemophilus influenzae d 嗜血流感杆菌d株 同一菌株中所含的多个不同的限制性核酸内切酶 DNA中的杂质如蛋白质、酚、氯仿、乙醇、SDS、EDTA等都会影响酶的活性。 1. DNA的纯度 （四）影响限制性内切酶活性的因素 ① 纯化DNA ② 加大酶的用量 1 mg DNA 用 10 U 酶 ③ 延长反应时间 ④ 扩大反应体积（20?l） 一般采取 大肠杆菌一般有两种甲基化酶修饰质粒： 2. DNA的甲基化程度 dam甲基化酶（修饰GATC中的A）； dcm甲基化酶（修饰CCA/TGG的C）。 基因工程中必须使用甲基化酶失活突变的菌株。 大肠杆菌中的dam甲基化酶在5‘GATC3’序列中的腺嘌呤N6位引入甲基，受其影