实验3环境中微生物的检测和.ppt1PPT
实验三 环境中微生物的分离和纯化 ;一、实验目的 ;二、实验内容 ;三、实验原理;高压蒸汽灭菌原理;二)、从土壤中分离和纯化微生物的实验原理 ;四、实验仪器、材料和用具 ;4.试剂 ;五、实验步骤 ;培养基制备过程:;分装:根据配制培养基的不同进行分装(液体培养基先分装后灭菌,固体培养基先灭菌后分装)
(1)液体培养基:将配制的液体培养基分装到试管或三角瓶中(注:分装试管时,培养基装量为3-4ml;分装三角烧瓶时,培养基装量以不超过三角烧瓶容积的1/2为宜)。
;加塞、包扎和灭菌:
分装后的培养基,试管用试管帽,三角瓶用封口膜封好瓶口,贴上标签,注明培养基的名称及配制日期后放入高压灭菌锅内灭菌。
灭菌时注意排空灭菌锅内空气,灭菌锅压力为0.1 Mpa(121℃),维持20-30min。 ;摆斜面和倒平板:
摆斜面:将灭菌后的试管摆放形成斜面,斜度要适当,斜面长度约为试管长度的1/2,培养基上部离管口5 cm以上。
倒平板:待培养基冷却至60-70℃时,无菌操作将培养基倒入已灭菌并干燥的平皿中,使其布满皿底。每皿装量15-20 ml(?90mm),厚度达2-3 mm,倒平板时,一般叠放平皿,以免过多蒸汽凝结在皿盖上,等凝固后 翻转平皿。
;;平板化线法示意图;注意事项:
划线接种时要掌握好角度和力量(划线时接种环与培养基表面约呈45度角),不可划破平板
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