实验六三过氧化氢酶活性的测定PPT.pptVIP

Please be quiet, 上课了！！ 蛋白质的性质和分离、纯化　 1、蛋白质的酸碱性质 等电点 与它所含的酸碱氨基酸数目比例有关 等离子点 蛋白质的一个特征常数 2蛋白质的胶体性质 维持蛋白质胶体性质稳定的因素（3点） 3蛋白质沉淀的方法 等电点沉淀法（ 可逆、不变性) 盐析法 （可逆、不变性） 有机溶剂沉淀法（ 可逆或不可逆） 重金属盐沉淀法 （变性） 生物碱试剂 （变性） 加热沉淀法 （ 变性） 强酸碱沉淀（不可逆） 4蛋白质的变性与复性（温和条件、变性因素、常用变性剂） 蛋白质的颜色反应 蛋白质相对分子质量的测定　　 a.根据化学组成测定最低相对分子质量 b.渗透压法测定相对分子质量 c.沉降分析法（超速离心法） d.※凝胶过滤法测定相对分子质量（分子筛层析） 此法比较简单，不要求复杂的仪器， 就能精确地测出Mr e.※SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子质量 根据分子大小不同的方法 透析和超过滤 利用溶解度差别的纯化方法（实践最常用的方法a盐析b有机溶剂分级分离） 根据电荷不同的纯化方法 （PAGE、醋酸纤维素薄膜电泳、离子交换层析） 利用选择性吸附的纯化方法 利用对配体的特异生物学亲和层析: 一步处理即 亲和力的纯化方法可分离所需