《单克隆抗体》ppt课件.pptVIP

单克隆抗体 什么是单克隆抗体 单： 克隆： 抗体： 单个细胞 无性繁殖 抗原 ———— 抗体 特异性结合 抗体是由何种细胞产生的？ 2 . 抗体是如何产生的？ ？ 单克隆抗体 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗体不纯 筛选单一浆细胞 不能增殖产生大量抗体 产量少、纯度低、特异性差 单克隆抗体 3、传统制备抗体的缺点是？ 3、传统制备抗体的方法是？ 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 单克隆抗体 问题讨论 提示： 1 .什么样的细胞可以产生抗体？ 2 .什么样的细胞可以无限增殖？ 瘤细胞和癌细胞有何区别？ 共同点：两者都有无限增殖的能力 不同点：瘤细胞不能转移 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 杂种细胞 单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 （选择性培养基） 选择性培养基： 　　使亲本细胞不能 存活而杂种细胞可存活 单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些？ 2.制备过程： 诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞? 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点? 注射抗原的目的是什么? 为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，并多次筛选？ 获得单抗的方法有哪些？ B BB B瘤 瘤瘤 瘤 细胞融合后培养液中有几种细胞？ 筛选杂种细胞 已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。 单克隆抗体 思考： 单克隆抗体 思考： 1. 小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？ 2. 制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？ 细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活 细胞融合技术、细胞培养技术 单克隆抗体 ① 在基础理论研究中具有重要意义 ② 在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。 ③ 生物导弹 （作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤） 单克隆抗体的应用 单克隆抗体的应用 应用: 疾病的诊断、治疗和预防。 优点:特异性强、灵敏度高。 实例: 1、各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断； 2、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。 3、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 ——灭活病毒 一个新细胞——杂交瘤细胞 一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 单克隆抗体