扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的研究课件.pdfVIP

扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的研究 扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的研究 摘要 栉孔扇贝(C矗肠，缈．加肿一)是我国重要的海水养殖经济贝类，曾给我国北 方水产养殖业带来巨大的经济效益。自上世纪90年代，我国北方扇贝养殖海区 连年暴发严重的栉孔扇贝大规模死亡，经济损失巨大。已有的研究证明，造成扇 贝夏季大规模死亡的病因是扇贝急性坏死症(A、咐D)，其病原为一种球形疱疹病 毒——A、仆Ⅳ。已有的研究表明，海区中的浮游生物能携带㈣，不同浮游生 物的携带能力存在区别。为了明确养殖海区携带越仆Ⅳ的主要浮游生物，有必 要首先对养殖海区浮游生物的季节性变化进行分析，了解在㈣，流行传播的 关键时期海区浮游生物的主要种类，从而为确定与删流行有关的浮游生物 提供参考。 为了掌握栉孔扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的情况及其变化，建立适合 月期间采自青岛流清河湾扇贝养殖海区的9个海水样品中微型真核浮游生物的 8S 多样性。依据l rDNA可变区序列的DGGE分析结果显示，流清河湾扇贝养殖 海区微型真核浮游生物包括甲藻、纤毛虫、眼虫、定鞭藻、硅藻、盘蜷虫、隐藻、 领鞭毛虫、变形虫和CeKozo锄，其中甲藻类和纤毛类生物的最高丰度分别达4l％ 和38．2％，是该海区的优势种类。对各月份DGGE谱带聚类分析结果表明，2009 年6、7、8、9月份微型浮游生物群落组成较为相似。此外，发现中肋骨条藻在 扇贝发病前后均有分布，结合A：Ⅵ小，已有的研究结果，本研究认为中肋骨条藻 是A、mV水平传播的参与者之一，但海区中广泛分布的甲藻和纤毛虫与A、NV 传播的联系还有必要进一步研究。 为了掌握荣成桑沟湾真核浮游生物多样性的情况，建立适合的研究方法。本 研究通过构建克隆文库和PCR．RFLP技术对2010年9月24日采自荣成桑沟湾 扇贝养殖海区表层的水样中真核浮游生物多样性进行了分析。海水样品依次经 25¨m，3um，0．22¨m滤膜过滤分别收集超微型真核浮游生物和微型真核浮游生 物，提取基因组DNA，依据18SrDNA可变区序列构建克隆文库，对阳性克隆 子进行PCR—RFLP检测，并且测序。研究结果表明，桑沟湾扇贝养殖海区超微 扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的研究 和 和绿藻门(Clllorophyta)都是主要的类群，这些物种在扇贝养殖海区中具有不同 的功能，既有扇贝的饵料生物，也有赤潮生物。中肋骨条藻在该海区微型真核浮 游生物群落中被发现，是已被证明的可以携带AⅥW的浮游微藻。 为了了解青岛流清河湾和荣成桑沟湾超微型真核浮游生物的多样性，比较超 微型真核浮游生物群落的周年变化。本研究采用DGGE技术对2010年5月到 2011年4月问采自两个扇贝养殖海区表层的海水进行分析。研究结果表明，桑 沟湾扇贝养殖海区超微型真核浮游生物多样性高于流清河湾。对两个海区各月份 的DGGE图谱进行聚类分析，结果表明桑沟湾扇贝养殖海区超微型真核浮游生 物群落，除夏季以外，其群落较为稳定。青岛流清河扇贝养殖海区不同月份的超 微型真核浮游生物群落变化较大，相似性较低。本研究说明桑沟湾扇贝养殖海区 生态条件较稳定。 关键词：栉孔扇贝；真核浮游生物；DGGE；克隆文库：PCR．IⅫLP； 扇贝养殖海区真核浮游生物多样性的研究 of intheSeaA他afor Eul【a删cplankton StlldyDiVe玮i哪of Cultllre Sc枷op Abstl隐ct me cultlJred．m The usedtobeoneof m面orspecies scallop，C办j口M声．加，．陀，．f，is