氧化预处理骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究 苏州大学.pdfVIP

■●1●j-l 本人完 即：学位论 质论文的内 信息情报中 中国学术期 文档，允许 保存和汇编 据库进行检 本学位 目的：经心导管用明胶海绵栓子栓塞猪的冠状动脉左前降支(LAD)，建立心肌 梗死的模型。在心梗后1d采用心导管介入术经冠状动脉注射等量的未处理及预处理的 骨髓间充质干细胞(MSCs)，心梗4w后注射未经处理的骨髓间充质干细胞。研究体 外经过预处理的MSCs抗凋亡的机制，经冠脉注射后观察心梗后迁移定植情况及对心 肌梗死后心功能的影响，对其可能的机制进行初步探讨。 方法：将第三代MSCs置入十二孔板培养皿中培养，予以不同浓度的过氧化氢 (H202)预处理MSCs24h，应用流式细胞仪检测MSCs的凋亡情况及细胞表面CXCR4 蛋白表达情况，以WesternBlot检测细胞内凋亡蛋白的表达情况。梅山猪20头，随 机分为4组：A组为空白对照组；B组为心梗后一天移植未经处理的MSCs；C组为 心梗后一天移植经过氧化氢预处理的MSCs；D组为心梗后4周后移植未经处理的 7／5mE)经心导管注 MSCs。应用明胶海绵栓塞LAD，建立心梗模型。干细胞(1x10 梗后、干细胞移植后4w时心功能状况，干细胞经过纳米铁标记后应用1．5TMRI检测 移植入体内的干细胞的迁移定植情况。干细胞移植后4w获取动物心脏，病理切片 HE染色切片观察心肌组织学变化，普鲁士蓝染色检测心肌组织内被标记的干细胞的 定植。通过TUNEL法检测梗死心肌周围区心肌细胞凋亡情况，Ⅷ因子免疫组化染色 计数新生血管密度。 胞仪检测其体外凋亡率与未处理的骨髓间充质干细胞无差别(pO．05)，经过H202 升高(p0．05)； (3)Ⅷ因子免疫组化示：梗死 检测MSCs移植4w后心梗面积缩小减少(p0．05)； 交界区新生血管的密度降低(p0．05)。 CXCR 结论：l、低浓度H202预处理不会增加MSCs的凋亡率，但促进Bcl．2、 4的表达。2、氧化预处理可以提高MSCs向梗死心肌及周围区的迁移和定植。3、经 过低浓度H202预处理的MSCs可以明显改善梗死心肌周边区的血供。4、经过低浓度 H202预处理的MSCs冠脉注射明显改善猪心梗后的心功能。 关键词：氧化预处理、细胞凋亡、骨髓间充质干细胞、心肌梗死、细胞迁移定植 作 者：邓俊 指导老师：沈振亚教授 Ⅱ 氧化预处理骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究 英文摘要 The Research‘On BM—MSCswith ExperimentalAutologous Oxidative InTheTreatmentOfAcute Preconditioning Infarction Myocardial t、I)， Abstract To theoxidative on stem objectiveinvestigate preconditioningimpactmesenchymal cells