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ppt11dna重组技术的基本工具
转绿色荧光基因鱼利用大肠杆菌生产人胰岛素转录翻译DNA(基因) mRNA蛋白质(性状)据WTO调查: 2017年2月我国约1.1亿。治疗糖尿病特效药——胰岛素每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。 1979年,美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内,实现了细菌生产胰岛素,大大降低了生产成本。思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关?通用密码子在生物界是 的!蓝色妖姬导入蓝色素基因玫瑰三色紫罗兰蓝色妖姬的产生目的基因受体细胞专题1 基因工程一、基因工程的概念 基因工程,是指按照人们的愿望,在DNA分子水平上进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在NDA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫DNA重组技术。一、基因工程的概念(大本P1)定向改造生物的遗传特性,从而产生定向的变异,并可实现不同物种间的基因交流,打破生殖隔离。应与现代进化论中的“变异是不定向的”、“物种间存在生殖隔离”区分开来。(1) 育种周期短意义(优点)(2)克服远缘杂交不亲和的障碍(3) 定向培养新品种(定向改造生物性状)二、基因工程的诞生1.基础理论:(1).DNA是遗传物质的证明(2).DNA双螺旋结构和中心法则的确立拼接的基础:①基本组成单位相同:不同生物的DNA分子都是由脱氧核苷酸构成的。 ②空间结构相同:不同生物的DNA分子一般都是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链形成的规则的双螺旋结构。 ③碱基配对方式相同:不同生物的DNA分子中两条链之间的碱基配对方式均是A与T配对,G与C配对。总结:基因的组成、空间结构和碱基互补配对方式相同二、基因工程的诞生1.基础理论:(3).遗传密码的破译表达的基础:①基因是控制生物性状的独立遗传单位。②遗传信息的传递都遵循中心法则阐述的信息流动方向。③生物界共用一套遗传密码。相同的遗传信息在不同生物体内可表达出相同的蛋白质二、基因工程的诞生2.技术发明:(1)基因转移载体的发现(2)工具酶的发明(3)DNA合成和测序技术的发明(4)DNA体外重组的实现(5)重组DNA表达实验的成功(6)第一例转基因生物的问世(7)PCR技术的发明三、DNA重组技术的基本工具转基因一、“分子手术刀”二、“分子缝合针”三、“分子运输车”三、DNA重组技术的基本工具苏云金芽孢杆菌 普通棉花(无抗虫特性)提取通过运载体导入抗虫基因 转基因棉花含抗虫基因 转基因棉花产生伴胞晶体 转基因棉花有抗虫特性在以上过程中关键步骤或难点是什么?三、DNA重组技术的基本工具基因工程培育抗虫棉的关键步骤及解决工具:关键步骤一:抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来“分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶关键步骤二:抗虫基因与质粒DNA“缝合”“分子缝合针”—— DNA连接酶关键步骤三:抗虫基因进入棉花细胞“分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(1)来源:主要来自原核生物(2)特点:具有专一性(特异性)①识别双链DNA中特定核苷酸序列②切割磷酸二酯键(3)作用:特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开限制酶是一类酶而不是一种酶用限制酶切割烟草花叶病的的核酸获取目的基因( )×55 A磷酸二酯键1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(4)限制酶识别序列:大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成少数的识别序列由4、5或8个核苷酸组成产生黏性末端或平末端(5)结果:种类与命名:SmaⅠ粘质沙雷氏杆菌(Serratia marcesens)大肠杆菌(Escherichia coli R)EcoRⅠ练习:流感嗜血杆菌的d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分离到3种限制酶,则分别命名为:HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ 限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线(如图),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的。EcoRⅠ黏性末端 黏性末端SmaⅠ平末端 平末端寻根问底 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗? 原核生物易受自然界外源DNA的入侵,但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会利用限制酶将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的目的。基础过关:下列四条DNA分子,彼此间具有粘性末端的一组是 ( ) A.①② B.②③ C.③④ D.②④3.下列四条DNA分子,彼此间
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