三液相色谱应用技术02.pptx

液相色谱应用技术 戴安中国有限公司 提纲:1. HPLC的广泛应用2.色谱柱子的选择性和应用3.色谱柱的使用和维护保养4.液相色谱仪系统清洗一.HPLC的广泛应用 据2004年统计，世界上化合物总数多达4700多万种在全部有机化合物中仅有20％左右的样品适用于GC分析而HPLC可对80％左右的有机化合物进行分离和分析HPLC的广泛应用 HPLC特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析并且可以做制备 在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域都有着广泛的应用潜力。HPLC的应用领域在食品研究中的分析应用食品中的天然成分类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇碳水化合物脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂色素维生素污染物霉菌（黄曲霉毒素〕农药残留和兽药残留多环芳烃（PAHS〕和亚硝酸HPLC的应用领域 在医药研究中分析应用 药物分析有USP、BP、CP等标准 常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。 在兽药研究中分析应用 HPLC的应用领域 在生物化学和生物工程中的应用氨基酸、多肽合成和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（儿茶酚胺类) 在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究药物、农药、染料、炸药等工业产品HPLC的应用领域化妆品行业要控制和分析： －防腐剂、防晒剂、性激素以及维生素等；在公安、刑警破案工作需要 －投毒药物、毒品分析等在环境污染分析中的应用－废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留、 酚类、胺类和二恶瑛的检测 在无机离子分析中应用－饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析 二.色谱柱的选择和应用非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18柱，PH范围2-9（12）强极性化合物一般采用离子交换柱糖类，氨基酸，有机酸，多环芳烃，GPC有专用柱正相柱-硅胶柱,-CN氰基柱,-NH2氨基柱戴安新型柱：PA,PA II,WAX,WCX,LILIC_1,Trinity选择柱子的重要性不同的分析对象选择不同的柱子不同公司有不同品牌和不同种类填料的柱子HPLC色谱柱子品牌杂种类多C18柱子填料末端封尾的重要性 键合相色谱柱以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳八、胺基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有柱填料的70-80%优点∶固定相稳定，不易流失应用广泛，可使用多种溶剂消除硅羟基的不良影响缺点∶pH值不能小于2或大于8同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同50.0RI_1μRIU40.030.0220.041367510.08210.0min-10.00.02.55.07.510.012.515.017.520.0HPLC测定糖－正相氨基柱,示差检测Analytical column: Ultimate XB-NH2, 4.6 *250 mm *5 μm at 30 oC Mobile Phase: ACN/H2O (V/V，65/35) Flow: 1.0 mL/min Detection: RI at 30 oC Peaks: Conc.(mg/mL) 1: 木糖2.0 2: 果糖2.0 3: 葡萄糖2.0 4: 蔗糖2.0 5: 麦芽糖2.0 6: 乳糖2.0 7: 麦芽三糖2.0 8: 麦芽四糖2.0 Re-mix the mobile phases can ensure the flat baseline!HILIC柱与CAD检测器分析糖类化合物LC ：Ultimate 3000 column: HILIC 5um 4.6x250mmFlow: 1.0 mL/minDetection: CAD ultra @ 30oCMP: ACN : H2O = 70:30核糖半乳糖戴安C18柱应用-17种氨基酸分析样品：1.门东氨酸(Asp) 2.丝氨酸(Ser) 3.谷氨酸 (Glu) 4.甘氨酸 (Gly) 5.组氨酸 (His) 6.氨(NH3) 7.精氨酸 (Arg) 8.苏氨酸 (Thr) 9.丙氨酸 (Ala)