自噬在蛋白酶体抑制剂抗甲状腺癌中作用39页.pdfVIP

·中文论著摘要· 自噬在蛋白酶体抑制剂抗甲状腺癌中的作用 ’ 目 的 明确蛋白酶体抑制剂对人未分化甲状腺癌细胞的自噬活性的影响，并进 一步探讨自噬在蛋白酶体抑制剂抗甲状腺癌中的作用。 方法 1、实验细胞：人未分化甲状腺癌细胞系FRO，于含10％胎牛血清的DMEM 培养液中、37℃、5％C02、饱和湿度下培养，2,-3d传代一次，选用对数生长 期细胞进行实验。 2、相差显微镜观察细胞形态；吖啶橙染色荧光显微镜观察酸性囊泡的形 成；脂质体转染法建立FRO．GFP．LC3稳定转染细胞系后荧光显微镜观察自噬 标记物LC3的分布；MTT比色分析法检测蛋白酶体抑制剂对细胞增殖的影响。 3、实验分组：为明确蛋白酶体抑制剂MGl32对FRO细胞自噬活性的影 +EBSS组；为明确自噬抑制剂对蛋白酶体抑制剂MGl32细胞毒性的影响，设 组、wortmannnin(各浓度)+MGl32(各浓度)组。 结 果 1、蛋白酶体抑制剂MGl32对FRO细胞自噬活性的影响 相差显微镜下，MGl32作用于FRO细