抗体分子PPT.ppt

Reuben S等人用DT40细胞系（由鸡的B淋巴细胞瘤中获取）研究，结果表明DT40细胞中AID的缺陷将导致基因转换的缺陷，检测Vλ重排后的基因序列未发现任何一个单一的基因转换，而出现的仅有的三个单核苷酸的置换（频率为10－5）可能为PCR错配所致。而其中机制可能是因为对DNA的损害，造成DNA双链的断裂所致[7]。在上面提到的AID-BER途径中，当AP－核酸内切酶切开磷酸二酯键，而这个切口未被BER及时修复，将在重排后的V区发生核苷酸置换即将假基因置换进入，有时是插入或删除某些核苷酸，则将导致基因转换。（图1）此种基因转换机制在鸡和兔是B细胞中Ig多样性产生的主要机制，但在人和小鼠中还未得到论证[4]。而关于基因转换的具体机制也还未清楚阐明。 再次重组 类别转换(class switching) S-S 重 组 重链恒定区的结构和重组 膜表达和可溶性表达 抗体分子的应用 应用范围： 基础研究的应用 诊断试剂 临床疾病的治疗 抗体技术的发展经历了三个阶段 第一代：多克隆抗血清 第二代：细胞工程抗体 第三代：基因工程抗体 细胞工程抗体——杂交瘤-单克隆抗体 抗体分子 抗体——生物体最奇妙的分子 ●无限的多样性（diversity) ●功能与结构的双重性 可变区——抗原结合 恒定区——生物学效应功能 ●分泌型和膜型表达 与抗体有关的诺贝尔奖获得者 1901 von Bering 血清治疗 1908 Ehrlich Metchnikoff 抗体生成、吞噬 1972 Edelman Poter 抗体分子结构 1977 Yalow 放射免疫测定 1984 Koler,Milstein Jerne 单克隆抗体 1987 Tonegawa Ig基因结构 抗体 Γ球蛋白(丙种球蛋白） 免疫球蛋白 免疫球蛋白的分子结构及分类 免疫球蛋白的功能 免疫球蛋白基因结构及多样性产生的机制 免疫球蛋白的来源 抗体分子的应用 一、免疫球蛋白的基本结构 CL CL CH1 CH1 VL VL VH VH CH2 CH2 CH3 CH3 C端 N端 恒定区 可变区 FC 段 Fab段 铰链区 1、重链和轻链 重链可分为μ、γ、α、δ、ε链；轻链可分为κ、λ型。 2、可变区 （1）重链和轻链N端约110个氨基酸为可变区（variable region,V区)，V区存在3个高变区（hypervariable region,HVR1~3)及4个骨架区（framework region, FR1~4).三个高变区共同组成Ig 的抗原识别部位，形成与抗原决定基互补的表位。高变区也称互补决定区（complementarity-determining region, CD1~3)。 3、恒定区 重链和轻链C端为恒定区，不同Ig重链其不同长度，有的只有CH1~3,有的则由CH1~4，CH2（IgG)或CH3（IgM)有补体结合位点。 相同种属、同一类别的Ig 氨基酸序列基本恒定。 4、铰链区 铰链区位于CH1和CH2之间，含有丰富的脯氨酸。 IgG1,IgG2,IgG4和IgA的铰链区较短，而IgG3和IgD的 铰链区较长；IgM和IgE无铰链区。 有木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的酶切位点。 木瓜蛋白酶 胃蛋白酶 Fab Fab Fc F(ab’) pFc’ 木瓜蛋白酶 胃蛋白酶 二、免疫球蛋白水解片段 三、J链和分泌片 1、J链（joining chain)是一条多肽链，由浆细胞分泌，富含半胱氨酸。可连接Ig单体形成二聚体、五聚体等。 IgG 、IgD、IgE及血清型IgA为单体，故无J链。 分泌型IgA为二聚体；IgM为五聚体，各单体间由二硫键相连，并通过二硫键与J链相连。 2、分泌片（secretory piece,SC) 是分泌型IgA分子上一个辅助分子，由黏膜上皮细胞合成和分泌，结合于二聚体后，被分泌到黏膜表面。 作用：保护铰链区免受酶解；介导分泌型IgA转运到黏膜表面。 免疫球蛋白的功能 一、V区功能 识别并特异性结合抗原，这种特异性是由IgV区，特别是HVR（ CDR3）的空间构象决定的。 抗原结合价：单体为两价；双体为四价；五聚体理论上为十价，但实际为五价。 免疫效应 （1）可溶性Ig可通过V区与抗原性物质发生特异性结合，发挥中和或催化作用。 （2）做为信号抗体。 二、C区功能 1、激活补体 主要是IgM、IgG1~3与抗原结合后通过经典途 径激活补体活化。 聚合的IgA可通过旁路途径激活补体。 IgD 、IgE及IgG4不能激活补体 2、结合细胞表面