植物悬浮细胞系的建立PPT.ppt

植物悬浮细胞系的建立;定义：植物细胞或小的细胞聚集体在液体培养基上，于摇床上进行悬浮培养。 ;研究中的应用：;3 野生甘草资源濒危与甘草需求量日益增加的供求矛盾，悬浮细胞培养具有繁殖速度快、能进行大规模培养和可提供较大量均一一致的植物培养物、并进行植物次生代谢物的生产的优点。 总之，建成的悬浮系细胞增殖速度快、重复性好、在基因遗传转化、原生质体的分离、培养和杂交、突变体筛选以及人工种子等方面有着广泛的应用，成为现代植物新品种培育的有效工具之一。;香花槐愈伤组织 及悬浮培养的细胞;悬浮培养的基本形式;植物细胞悬浮培养操作过程;悬浮培养特点;影响悬浮培养的因素;生理参数的测定确定继代时期;细胞鲜重测定 将悬浮培养物倒在已知重量的滤纸上，用去离子水洗去培养基。真空抽滤除去细胞上沽着的多余水分，然后称重细胞鲜重= 鲜细胞和湿滤纸的质量- 湿滤纸质量;细胞密度测定 每2d用吸管取悬浮培养细胞，用5%铬酸处理后，将其分散均匀，然后用血球计数板进行细胞技术并绘制曲线;桑树悬浮细胞分裂指数测定 每2d取悬浮培养细胞，加入少量5%铬酸，使细胞分散均匀。滴一滴细胞悬浮液于载玻片上，滴一滴醋酸洋红染液，盖上盖玻片，在酒精灯上微热则细胞核被染上色而胞质无色，于光镜下观察技术1000个以上细胞，记录分裂期和分裂间期细胞个。 细胞分裂指数（%）=[分裂期细胞数／细胞总数]×100%;细胞活力的测定方法;继代方法;操作注意事项： 对悬浮细胞继代时，进液口的孔径要小，只能通过单细胞或小细胞团。 继代前，培养容器静置短时间，大细胞团沉降，再吸取上层悬浮液。 依次，多次，可建立良好的细胞悬浮液 ;成功的悬浮培养体系的三个基本条件