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王镜岩生物化学讲义 1蛋白质PPT
第一章 蛋白质;C;特点:含氮量较恒定,一般在16%左右
蛋白质系数——6.25
蛋白质含量 = 样品含氮量?6.25;第二节 氨基酸;中文:如 甘氨酸;
英文:三字母符号(Gly)和单字母符号(G);二、必需氨基酸(8种):
人体不能自我合成,必须从外界中摄取的氨基酸;氨基酸
丙氨酸
缬氨酸
亮氨酸
异亮氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
甲硫氨酸
脯氨酸;NH2—CO—CH2—CH2—;NH3?—CH2—CH2—CH2—CH2—;三、氨基酸的理化性质;等电点定义:某一氨基酸的净电荷等于零时的溶液pH值为该氨基酸的等电点
不同的氨基酸有不同的等电点
等电点时的特点:溶解度下降
用途:可根据氨基酸的等电点来分离不同氨基酸,如味精生产时将pH值调到3.22,谷氨酸沉淀下来。;pI计算法: pI=(pK左′+pK右′ )/2
pK左′ : pI处左侧pK ′值, pK右′ :pI处右侧pK ′值。
如:甘氨酸的两性解离为:;赖氨酸的两性解离为:;3. 吸收光谱:
所有20种基本氨基酸在可见光区都无光吸收,在近紫外区三种芳香氨基酸具有紫外吸收,
即:苯丙氨酸—257nm、
酪氨酸—275nm、
色氨酸—280nm;氨基酸表观解离常数和等电点; 用途:可用于氨基酸的定性和定量测定
脯氨酸是亚氨基酸,只有一步反应,反应产物为黄色。;(2)Sanger反应
氨基酸与二硝基氟苯(DNFB)反应,生成二硝基苯代氨基酸(DNP—氨基酸);(3)Edman反应
异硫氰酸苯酯与氨基酸反应生成PTH—氨基酸; 5.氨基酸的分离方法
(1)分配层析 固定相,流动相;样品1;第三节 肽;由于有巯基,所以有氧化还原反应
GSH + GSH ? GS—SG + 2H+ +2e-
谷胱甘肽是生物体内重要的氧化还原物质,对细胞起到了保护作用,另外,还是其他细胞保护剂的还原剂;;第四节 蛋白质结构;?;二面角— ?和?两个构象角称为二面角;非键合原子之间最小接触距离 (nm); a-螺旋:要点:单链、右旋,一圈3.6残基,上升0.54nm,形成5→1氢键且全部平行,R-基指向外侧;?-折叠:肽链伸展,形成链间氢键(成为片层),R-基处于片层上下;反平行b-折叠;? -转角(回折):肽链180°旋转,氢键连接;;卵溶菌酶;三、超二级结构:概念:相邻二级结构单元 相互作用形成的聚合体;四、结构域:概念:蛋白质分子中在空间相对独立的三维实体。;例:肌红蛋白。是肌肉中运输氧的蛋白质,一条肽链,153个氨基酸残基,分子量为16700,含一个血红素辅基,氧分子就结合在它的铁上。整个分子有8个?-螺旋,并且有?-转角和无规则卷曲,但是无?-折叠 。;特点: ① 高低不平;③ 外亲内疏;如:血红蛋白含有四个亚基,为?2?2,每个亚基含一个血红素,每个血红素可结合一个氧分子。?亚基含141个氨基酸残基,?亚基含146个氨基酸残基。; 氢键、盐键、疏水作用力、二硫键、配位键、范德华引力 ;;;;;;;;;;一、蛋白质的功能:催化、运转、运动、能量交换、免疫、激素、调节、结构、贮存
二、一级结构与功能的关系:一级结构与功能有密切的关系
1. 氨基酸对功能的重要性 如果改变的氨基酸是蛋白质执行功能所必需的,则这种氨基酸的改变对功能的影响极大,如果改变的氨基酸对功能无贡献,则它们的改变基本不影响蛋白质的功能。
如RNA酶,如果将其N-端的三个氨基酸去掉,酶的功能基本不变,但是,如果将组12改变,则酶失去活性。 ;镰刀状贫血病:就是由于血红蛋白?-链上第六位的谷氨酸被缬氨酸代替,使得血红蛋白分子在氧分压低的情况下容易聚合,形成杆状多聚体,致使红细胞由正常的圆盘状成为镰刀状,血液流动受到阻碍。;同源蛋白:不同生物中具有同一功能的蛋白质。它们的特点是其一级结构中,与功能直接相关的残基相同,而其它残基有差异,这些残基是可以改变的,这种变化往往与生物进化有关。例:Cytc与进化
生 物 残基改变数 生 物 残基改变数 生 物 残基改变数
黑猩猩 0 狗 11 狗鱼 23
恒河猴
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