生化复习——蛋白质的生物合成PPT.ppt

参与的物质 （1）30S和50S亚单位 mRNA fMet－tRNAifMet （2） GTP （3）Mg2+ （4）起始因子 （一） 原核生物翻译的起始  三种起始因子的作用： IF1:防止氨基酰-tRNA进入A site IF2：引导fMet－tRNAifMet进入 P site IF3：防止30S结合50S亚单位 2.起始过程 Step 1 Step 2 Step 3 Step 1： 30S亚单位在mRNA上定位 过程：30S亚单位依次结合IF3 (E site),和IF1 （A site）； 30S亚单位16SrRNA-3′端与mRNA的SD序列互补，结合到mRNA,并使起始密码子准确定位在P 位点。 SD序列（Shine-Dalgarno ） : mRNA分子中紧靠起始密码子上游的一段富含嘌呤碱基的8－13核苷酸的序列。又称为核蛋白体结合位点（ribosomal binding site，RBS)　　 Step2 ：定位fMet－tRNAifMet fMet－tRNAifMet-IF2－GTP 进入 P site，并与起始AUG配对。 Step3 ：结合50S大亚单位，形成70S复合物 起始密码子和反密码子的配对，使 30s构象改变，释放IF3，结合50S大亚单位，释放IF2和IF1，形成70S起始复合物。 消耗1个GTP （二）真核生物翻译起始 起始即将40S亚单位和Met－tRNAiMet 、mRNA 、 60S亚单位组装成80S起始复合物的过程。 1. 43S 复合物的形成 40S结合多种起始因子（ eIF1A、eIF3 、eIF5B-GTP），并俘获eIF2－GTP-Met－tRNAiMet（P site），形成43S 复合物。 2.小亚单位在mRNA上的定位 mRNA的5′Cap与复合体eIF4F结合，并俘获eIF4B,RNA解旋,形成eIF4F/4B－mRNA复合体。 eIF4F/4B－mRNA 俘获43S复合物，43S复合物沿mRNA 5′ 3′方向扫描起始AUG， 在mRNA上准确定位。 3、80S复合物的形成 Met－tRNAiMet的反密码子与mRNA的起始密码子配对，使eIF2、 eIF3 释放，60S与40S结合，eIF5B水解GTP，释放其他起始因子，形成80S复合物。 消耗GTP 真核与原核生物肽链合成起始的主要区别 1）更多的起始因子参与 2）Met－tRNAiMet先定位到核糖体 3）mRNA结合多种起始因子后才与核糖体结合 4）小核糖体通过Met－tRNAiMet的反密码子与mRNA起始密码子之间互补配对而准确定位. 二、延伸 1.需要70S（80S)起始复合物、氨基酰-tRNA、延伸因子、GTP 延伸因子： 原核：EF（Tu， Ts， G) 真核：EF-1 和 EF-2 2.三步循环 进位 成肽 转位 （一）step 1－进位 过程：氨基酰-tRNA-Tu-GTP结合到A site，GTP水解，释放Tu-GDP 只有与密码子正确互补配对的氨基酰-tRNA才能进入A位点：维持蛋白质合成准确性的另一个机制。 进位消耗1GTP Tu-GTP ： 在Ts（GTP交换因子）的参与下生成。 Tu：GTPase活性 Step 2－成肽 过程：A site中氨基酰－tRNA的氨基攻击P site的fMet－tRNAfMet (肽酰－tRNA）形成肽键，生成二肽酰（肽酰）-tRNA(A site)， tRNAfMet （空载的tRNA）留在P site。 催化肽键形成的酶：转肽酶( 23SrRNA) 能量：氨基酰－tRNA中高能键断裂提供 Step 3－转位 过程：核糖体向mRNA 3′方向移动一个密码子 → 二肽酰－tRNA进入P Site, 空载的tRNA进入E site并由此进入胞质,第三个（下一个）密码子进入A site，进入下一个延伸循环。 转位需EF-G-GTP水解提供能量 (转位酶） 。 三、终止 1.以终止密码子出现为信号 2. 释放因子： 原核三个： RF1(UAG/UAA), RF2(UGA/UAA), RF3(促进RF1或RF2从核糖体上释放） 真核：eRF1、 eRF3(eRF3-GTP) 3.终止过程 过程： （1）终止密码子进入A site，RF1（或RF2）与之结合，水解肽酰－tRNA键，肽链释放。 （2） 30S亚单位结合RF3-GDP , 并转变为RF3-GTP， RF1从核糖体上释放。GTP水解， RF3-GDP从核糖体上释放。 （3）RRF（A site）、EF-G-GTP、 IF3依次结合到核糖体, 3