电解质与药物对离体蛙心活动的影响PPT.ppt

电解质与药物对离体蛙心活动的影响 授课教师：林海英 【实验目的】 掌握Straub离体蛙心的灌流方法 观察高钾、低钙、高钙、肾上腺素、乙酰胆碱与酸、碱等对离体心脏活动的影响 蛙心起搏点：静脉窦 蛙心的正常节律活动的维持需要一个适宜的理化性质：任氏液 心脏的正常活动有赖于内环境的相对稳定，改变灌流液的成分可引起其活动的改变。 心肌生理特性：兴奋性、自律性、传导性、收缩性 【实验原理】 影响心肌生理特性的主要因素 1. 兴奋性：静息电位与阈电位的差距；Na+通道的性状 2. 自律性：最大复极电位与阈电位的差距；4期自动去极的速度 3. 传导性：动作电位0期去极的速度和幅度 4. 收缩性：细胞外钙离子浓度 对心肌活动的影响： （1）离子：K+、Ca2+ （2）肾上腺素（adr）和乙酰胆碱（ACh） （3）酸和碱： （1）记录正常蛙心波动曲线（幅度、频率） （2）更换为无钙任氏液（0.65%NaCl ） （3）加2%CaCl2 1~2滴 （4）加1%KCl 1~2滴 （5）加1:10000的adr 1~2滴 （6）加1:100000的ACh 1~2滴 （7）加2.5%的NaHCO31~2滴，有变化后加3%的乳酸半滴，待效应明显后，再加1～2滴2.5％NaHCO3， 【注意事项】 1.蛙心插管一定要插入心室，勿用力过大损伤心肌 2.结扎静脉时，要远离静脉窦 3.换能器头端应向下倾斜以免液体进入换能器 4. 实验各项目，一旦出现变化就应立即用任氏液换洗（冲洗3次）；必须待心功能恢复正常后方能进行下一步实验 5.蛙心插管液面应保持恒定以保证心脏固定的负荷 6.随时滴加任氏液在心脏表面使之保持湿润 7.滴加药品和换取任氏液须及时标记，以便观察分析 8.吸任氏液和吸蛙心插管内废液的滴管应区分专用，不可混淆使用，以免影响实验结果 9.药物作用不明显时，可适量增加，密切观察药物剂量添加后的实验结果 【注意事项】 【实验结果】 项目 心率 收缩幅度（收缩力） 无钙任氏液 3%CaCl2 1%KCl 1：10000肾上腺素 1：100000Ach 2.5%NaHCO3 3%乳酸 ↓ ↓ ↑ ↑ （“钙僵”） (甚至停于舒张期) ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ ↑ ↑ ↑ ↑ 【讨论】 1.无钙 任氏液 无钙任氏液灌流 细胞外液Ca2+ ↓↓ 心肌细胞动作电位期间 Ca2+ 内流↓↓ 心肌细胞胞浆Ca2+ ↓↓ 心肌收缩力收缩 ↓↓ 细胞外液Ca2＋浓度升高 工作细胞动作电位期间Ca2＋内流增加 肌浆Ca2＋浓度增加 兴奋收缩耦联增强 心肌收缩力增强 2. 3%CaCl2 慢反应细胞4期自动除极化速度增加 自律性增加 心率增快 细胞外液K＋浓度升高 K＋抑制 Ca2＋内流 收缩力↓ Ca2＋内流↓ 兴奋收缩 耦联削弱 3. 1%KCl 浦氏细胞最大复极电位去极，If电流激活程度↓ 自律性↓ IK1通道通透性↑， K＋易于外流，对抗了If内流的舒张去极 如果任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心会处于什么状态？ 当细胞外显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，使得静息电位绝对值减小至－55mv，使得钠通道失活，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态 （当细胞外轻度高钾时，膜内外K＋浓度梯度↓，静息电位↓， RP与TP的差↓，兴奋性↑） 心肌细胞膜β1受体结合 adr 肌浆网对Ca2＋通透性↑ 动作电位期间 Ca2＋内流性↑ 收缩力↑ 细胞膜对Ca2＋ 通透性↑ 4期自动除极 化速度↑ 自律性↑ 心率↑ 4.肾上腺素（adr） Ca2＋与肌钙蛋白亲和力↓，肌浆网摄钙速度↑ 舒张速度↑ 复极期肌浆Ca2＋浓度降低速度↑ 心肌细胞膜M受体结合 细胞膜对K＋ 通透性增加 自律性降低 心率减慢 细胞膜对Ca2＋通透性下降 动作电位期间Ca2＋内流减少 心肌收缩力降低 窦房结细胞最大复极电位绝对值增大 4期K+外流增加 ACh 抑制钙通道 5. 乙酰胆碱 （Ach） 6.酸和碱 乳酸和2.5%NaHCO3：H+进入心肌内膜后，可降低钙离子与肌钙蛋白的亲和力，促使钙离子的解离，收缩力↓。 NaHCO3中和了乳酸，解除了钙离子与肌钙蛋白亲和力的抑制，收缩力恢复 。 Thank you! 母液 成分 20%NaCl (ml) 10% KCl (ml) 10%CaCl2 (ml) 5% NaHCO3 (ml) 1% NaH2PO4 (ml) 葡萄糖 (g) 蒸馏水加至(ml) 任氏液 32.5 1.4 1.2 4.0 1.0 2.0 1000 任氏液的组成成分表 破坏脑和脊髓