第12章 翻译PPT.ppt

;;细胞内以mRNA为模板，将mRNA上的4种核苷酸排列顺序转变为蛋白质上20种氨基酸的排列顺序的过程。 mRNA是指导翻译的直接模板，蛋白质是基因表达的最终产物。;第一节 蛋白质生物合成体系;一、mRNA是蛋白质生物合成的直接模板; mRNA上存在遗传密码;密码子(codon)： mRNA上每3个相邻核苷酸组成一个三联体(triplet)，编码一种氨基酸，称之为~。 遗传密码(genetic code): mRNA中蕴藏遗传信息的碱基序列称为~，它是密码子的总和。;;;很重要的概念！ mRNA上从起始密码子到终止密码子之间的连续编码序列或是DNA上与之对应的序列。一个ORF编码一条完整的多肽链。 A reading frame is uninterrupted by translation stop codons. 不是任何一段从AUG到终止密码子之间的序列都能称为ORF，通常要求的长度是至少50个密码子。;Reading frames in the genetic code. 理论上，任何一条mRNA可能的阅读框架有3种，如上图所示，但通常只有其中一种阅读方式能产生有功能的蛋白质。;1. 方向性(direction);2. 连续性(commaless); 基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失，可能导致框移突变 (frameshift mutation)。 ;3. 简并性(degeneracy);4. 通用性(universal);线粒体密码子;5. 摆动性(wobble);;密码子、反密码子配对的摆动现象;Robert W. Holley 1922~1993;二、核糖体是多肽链合成的装置;;;;;;原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:;三、 tRNA是氨基酸的运载工具;tRNA的三级结构示意图;四、蛋白质生物合成需要的酶类、蛋白质因子等;氨基酸 + tRNA;第一步反应;第二步反应; tRNA与酶结合的模型;氨基酰tRNA合成酶;举例： Ala-tRNAAla ， Ser-tRNASer ，Met-tRNAMet 真核生物 起始者tRNA(initiator-tRNA): tRNAiMet 肽链延长中携带Met的tRNA： tRNAeMet 原核生物 起始者tRNA: tRNAfMet N-甲酰甲硫氨酸(fMet) 肽链延长中携带Met的tRNA： tRNAmMet;;第三节 肽链的生物合成过程;一、原核生物的肽链合成过程;原核、真核生物各种起始因子的生物功能 ;1. 核蛋白体大小亚基分离;A;mRNA在30S小亚基上的就位;IF-3;4. 核蛋白体大亚基结合，起始复合物形成;IF-3;（二） 肽链的延伸;原核延长因子;又称注册 (registration);延长因子EF-T： EF-Tu和EF-Ts亚基的二聚体。 ;;2. 成肽;3. 转位;转位;进位;fMet;当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。 ;一是识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 二是诱导转肽酶改变为酯酶活性，相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上，使肽链从核蛋白体上释放。 ;原核肽链合成终止过程 ;U;1;二、真核生物的肽链合成过程;真核细胞蛋白质合成的起始;;真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。;多聚核蛋白体(polysome);电镜下的多聚核蛋白体现象;翻译一条氨基酸残基数为N的多肽链所需的ATP;概念：翻译，密码子，遗传密码，ORF 遗传密码的特点： 连续性，简并性，通用性，摆动性 核蛋白体的组成 原核(70S)：30S + 50S 真核(80S)：40S + 60S P位与A位 氨基酸的活化 翻译的起始、延伸、终止;蛋白质合成后加工和输送;从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。;一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质;促进蛋白折叠功能的大分子; 1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GreE族 ;热休克蛋白促进蛋白质折叠的基本作用： 结合保护待折叠多肽片段，再释放该片段进行折叠。形成HSP70和多肽片段依次结合、解离的循环。 ;伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程 ;蛋白二硫键异构酶 ;肽-脯氨酰顺反异构酶 ;二、一级结构的修饰;（一）肽链N端的修饰;（二）个别氨基酸的修饰;（三）多肽链的水解修