第3章 农业微生物技术PPT.ppt

第3章 农业微生物技术;第一节 农业微生物概述;一、微生物分类;（一）微生物定义 ;（二）微生物的分类;微生物的命名法则 ;二、微生物形态与大小;（一）微生物的形态——细菌 ;细菌的形态;细菌的形态;细菌的形态和结构;微生物的形态——放线菌 ;微生物的形态——酵母菌 ;微生物的形态——霉菌;霉菌的形态;霉菌的形态;霉菌的形态;微生物的形态 ——担子菌;（二）微生物的大小 ;（三）微生物的菌落特征;细菌的菌落特征;放线菌的菌落特征;;酵母菌的菌落特征 ;霉菌的菌落特征;三、微生物结构;细菌的细胞结构图;酵母菌的细胞结构图; 霉菌的细胞结构图;原核微生物和真核微生物的差别; 四、微生物生活史 ——原核微生物生活史; 四、微生物生活史 ——原核微生物生活史; 四、微生物生活史  ——真核微生物生活史; 根霉生活史 ;曲霉的生活史（繁殖）;丝状真菌各亚门比较表 ;五、微生物营养 ;微生物培养基;第二节 农业微生物分离技术;一、微生物分离概述;（一）菌种分离的方法和种类;（二）优势菌的分离思路;思考一下： 优势菌还有其他分离方法了没有？ ;（三）不占优势菌的分离思路 ;富集培养应遵循的原则;二、土壤中细菌的分离; 小锅、天平、电炉、pH纸、漏斗、纱布、棉花、橡皮筋、试管、培养皿、灭菌锅、报纸、1 mL移液管、琼脂、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、涂布棒等 ;（二）技术路线 ;（三）土壤中细菌分离步骤 ;土壤样品采样; 3.土壤样品预处理 将样品放到事先灭菌的研钵中研碎混匀，取5g置于事先放入玻璃珠的无菌三角瓶中，加入无菌水100mL，振荡摇匀5min，3层纱布过滤，取滤液备用。 ; 4.稀释分离 首先，将制备好的菌悬液，置于60℃水浴15min，进行梯度稀释（10-1，10-2，10-3……10-10），涂布于事先制备好的NA平板（牛肉膏蛋白胨培养基）上，然后30℃下培养，24h后观察 。;培养基平板制备;5.纯化 挑取培养平板上长出的乳白色菌落，接种到试管斜面上，30℃下培养，24h后观察，如发现菌落生长不均一，重复稀释法，直至纯化至满意??止。; 6.鉴定及性能测试 根据细菌鉴定方法 对细菌进行鉴定，并对有意义的生产性状进行进一步地研究。;（四）土壤中细菌分离操作要点;（五）土壤中细菌分离的注意事项;三、植物上的真菌的分离;（一）工具准备;（二）技术路线;（三）植物上的真菌分离步骤 ; 3.植物样品预处理 采集的叶片，先用洁净的清水洗去叶片上的灰尘和杂物，晾干备用。 ; 4. 分离 取真菌性叶斑病的新鲜病叶，用剪刀剪取病健交界处的组织(边长4～5mm)数块；将病组织放入70%酒精中浸3～5s后，将病组织在0.1%升汞(氯化汞)液中消毒1min，然后在无菌水中连续漂洗3次，除去表面残留的消毒剂；按无菌操作规程将病组织移入平板培养基表面上，一般每皿放4～5块，并用玻璃铅笔注明培养材料的编号和种类；将平板培养基倒置后放入恒温箱内，在25℃下培养3～4 d后，将分离的目的菌在无菌条件下移入斜面培养基上，淘汰杂菌。;5.纯化 待平板上长出菌丝时，用解剖刀将菌落边缘切下，移入试管斜面，25℃培养，待长好后，4℃保藏备用。;;（四）植物上的真菌分离操作要点;（五）植物上的真菌分离注意事项;第三节 农业微生物保藏技术;一、微生物保藏的基本依据和方式 ;微生物常见的保藏方式 ; 二、菌种保藏技术 ------4℃斜面菌种保藏技术;4℃斜面菌种保藏应注意事项 ;技术路线 待保藏的菌种 ? 活化 ? 菌悬液制备 ? 明胶颗粒制备 ? 硅胶管准备 ? 保藏 ? 定期检查;技术路线 待保藏的菌种 ? 活化 ? 菌悬液制备 ? 明胶颗粒制备 ? 硅胶管准备 ? 保藏 ? 定期检查;技术路线 待保藏的菌种 ? 活化 ? 菌悬液制备 ? 明胶颗粒制备 ? 硅胶管准备 ? 保藏 ? 定期检查;明胶颗粒保藏技术操作步骤 ;; （3）明胶颗粒制备：将2%明胶溶液灭菌，待冷却至45℃，即不烫手背为宜。将菌悬液倒入明胶溶液，摇匀，用无菌滴管吸取溶液，滴至事先备好的无菌石蜡平板上，待凝固后形成明胶颗粒。 （4）硅胶管准备：将硅胶颗粒和玻璃棉放入培养皿在160℃下干热灭