第七章 干细胞PPT.ppt

五、胚胎干细胞系基本特性 体外无限增殖 体外产生分化细胞 体内产生畸胎瘤 巢状生长，有多能干细胞分子标记 染色体数目和核型正常 遗传可操作性 形成嵌合体实现种系传递 第四节 组织干细胞（成体干细胞） 一、组织干细胞概述 二、表皮干细胞 （ESCs） 三、骨髓干细胞 四、神经干细胞 五、成肌细胞 六、肝干细胞 七、成体干细胞研究中存在的问题 3 一、组织干细胞概述 1、概念 2、对组织干细胞的认识 1、概念 一群分布在成体组织中未分化的具有自我更新潜能的并负有构建和补充某种组织的各种类型的细胞的干细胞。 对成体干细胞的认识 传统观念：人体除血液、皮肤、消化管和肝有再生能力，其他组织没有再生能力；成体干细胞是专能的，只属于某种组织，即造血干细胞只能形成血细胞。 最新研究：成体干细胞的发育潜能可跨越组织和胚层界限如小鼠神经干细胞移植到经射线照射的骨髓，分化出血液细胞。此后发现可分化为肌细胞。表明微环境的改变，造成分化潜能的改变。 二、表皮干细胞ESCs ESCs的概念 ESCs的生物学特征 ESCs的鉴别与分离方法 ESCs的概念 存在于表皮内，一生均保持有增殖能力，可增殖分化为表皮中各种类型的细胞。 从再生能力角度：表皮中有表皮干细胞、短暂增殖细胞或祖细胞(transit amplifying，TA)、有丝分裂后(post-mitotic differentiating，PMD)细胞。 ESCs的生物学特征 自我更新增殖能力 慢周期性 对基底膜的黏附作用 形态学特点 定位 在体内表现为可增殖分化形成表皮的全层并维持自身的数量，在体外则表现为克隆性生长。 自我更新增殖能力 慢周期 体内表现为标记滞留细胞（label-retaining cell,LRC）。在新生动物细胞分裂活跃时掺入氚标记的胸苷，细胞在DNA合成的过程中摄取标记的核苷酸而将标记整合到?DNA中，由于干细胞分裂缓慢，这样的标记可以维持相当长的一段时间，因而可长期探测到放射性活性，如小鼠表皮干细胞的滞留标记可长达两年。 对基底膜的黏附作用 干细胞主要通过表达整合素实现对基底膜各种成分的粘附。各种整合素作为受体分子与基底膜各种成分相应的配体结合，如与层黏连蛋白结合的有整合素α1β1、α2β1、α3β1、α6β4，与纤连蛋白结合的有整合素α3β1，与胶原结合的有整合素α2β1。干细胞与基底膜粘附是干细胞维持其特性的基本条件。 形态学特点 超微结构均具有未分化细胞的特征；细胞体积小，细胞内细胞器稀少，RNA含量低，在组织结构中位置相对固定。 定位 定位隐蔽、安全，血供丰富，营养好。在没有毛发的表皮组织，ESCs与祖细胞（TA细胞）在表皮基底层呈片状分布，约占基底细胞总数的1%～10%。 ESCs的鉴别与分离方法  标记滞留细胞分析法 克隆分析法 细胞膜表面标志物 –整合素 细胞内标志物-角蛋白K15、K19 三、骨髓干细胞 造血干细胞 间质干细胞 第七章 干细胞 第一节 干细胞概述 第二节 胚胎干细胞的研究 第三节 成体干细胞的研究 第四节 在再生医学中的应用 第一节 干细胞概述 一、干细胞（stem cell）的概念 二、干细胞的特征 三、干细胞的分类 四、干细胞分化发育的途径 五、细胞因子 一、干细胞概念 具有自我更新、高度增殖能力的细胞，能产生表现型和基因型和自己完全相同的子细胞，同时还能分化为祖细胞。即这些细胞可以通过细胞分裂维持细胞群的大小，同时又可以进一步分化成各种不同的组织细胞，从而构成有机体各种复杂的组织和器官。 二、干细胞的一般特性 发育的全能性或多能性 无限的自我更新能力 长的生命周期及相对慢的增殖速度 极强的再生能力 易操作性 1、发育的全能性或多能性 ES细胞具有发育全能性，适当条件下，在体外长期培养或冻存，也不影响。小鼠ES在实验室已培养10多年。人类ES细胞在体外已传代250代。 组织干细胞以前一直以为只能分化出来源组织的细胞类型，目前的研究已发现可分化成来源以外组织的细胞。如骨髓间质干细胞，可分化为星形胶质细胞、神经细胞、少突胶质细胞、血细胞、肝细胞、肌细胞等。但多数组织干细胞是单能性的，如生精干细胞。 3、长的生命周期及相对慢的增殖速度 不同组织干细胞自我更新速度不同，如小肠和造血系统的上皮细胞更新速度较快，约12小时。但肝干细胞只在受损伤较重的情况下，才激活和分裂。神经干细胞长期存在在神经组织中，不知道它的功能是什么。 在机体稳定状态下，组织细胞数量的保持和补充主要是定向祖细胞。干细胞只是在必要时分裂补充定向祖细胞。相对祖细胞，干细胞分裂速度慢。 4、极强的再生能力 多数干细胞都有参与组织再生和修复