第三章酶学PPT.ppt

5.3 酶高效催化的因素 1.“邻近”和“定向”效应 2.张力学说(底物分子的形变与诱导契合） 3.共价催化 4.酸碱催化 5.微环境 6. 酶促反应动力学 酶促反应动力学：就是在化学反应动力学的基础上，讨论酶促反应的速度以及影响反应速度的因素。 基本概念 底物（S）——受酶催化的物质 产物（P）——化学反应的最终生成物 酶促反应速度的测量（二种方法）： 测定单位时间内底物的消耗量 测定单位时间内产物的生成量(较为准确) 在开始一段时间内，反应速度几乎维持恒定。 随时间延长：曲线斜率逐渐变小，反应速度逐渐降低。 因此：酶促反应的最初速度，能反映酶促反应的情况。 酶浓度 底物浓度 温度 pH 激活剂 抑制剂 6. 影响酶促反应的因素 6.1 影响酶促反应的因素—酶浓度 当底物浓度 [S] [E] 时 v = K [E] 反应速度v与酶浓 度[E]成正比关系 6.2 影响酶促反应的因素--底物浓度 V与[S]呈矩形双曲线关系 曲线 a ：一级反应， V与[S]成正比关系。 曲线 b ：混级反应。 不成正比关系，v 增加 变慢 曲线 c ：零级反应。 V到达最大值（ Vm）不 再增加。有饱和现象 1913 Michaelis 和 Menten 反应速度和底物浓度----米氏方程 中间产物学说-米氏方程 Km：米氏常数； Vm：最大反应速度 三点假设： 1.测定速度为初速度 2.底物浓度显著大于酶浓度 3.ES有一动态平衡 中间产物学说-米氏方程 米氏方程特点 当[S]低时，Km[S]，[S]可忽略不计。 则：V与[S]成正比关系，符合一级反应。 当[S]高时，Km《[S]，Km可忽略计。 则：V与[S]无关，符合零级反应。 米氏方程---Km意义 Km概念： 是酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 单位是浓度单位。 代入米氏方程 Km=[S] 米氏方程--- Km基本性质 Km是酶的一种特征性物理常数，是鉴别酶的参数， 与酶的性质、底物种类及反应条件有关 与酶的浓度无关。 在一定程度上代表酶与底物的催化效率 反映酶与底物的亲和力。 Km↑亲和力↓ 米氏方程--- Km的实际应用 鉴别酶 确定最适底物（当一种酶有几种底物，其中Km最小的） 确定酶活性测定所需的底物浓度 注意：米氏方程以单底物为例 双倒数作图推导过程 米氏方程变形 Lineweaver-burk作图法 ---双倒数作图法 小结 上述底物浓度对酶活性的影响是在单底物的情况下 米氏方程也只适用于单底物反应 酶的最适pH 值： 在一定pH 下，酶促反应具有最大反应速度，高于或低于此pH 值时反应速度下降，通常称此pH 值为….. 酶的最适pH 值不是一特征常数 6.3 影响酶促反应的因素—pH “吊钟形”曲线 pH影响酶活性的原因 1.过酸、过碱会影响酶分子的构象，甚至 使酶变性而失活。 2.pH改变能影响酶活性部位上有关基团 的解离。（辅酶和辅基的解离） 3.pH能影响底物的解离 4.此外pH改变还会影响ES的解离状态。 影响酶促反应的因素—pH 第三章 酶* 酶的化学本质和催化特性 酶的组成和结构特点 酶的分类和命名 酶的活性中心及专一性 酶的作用机理 酶促反应动力学 几种重要的酶 1.酶的化学本质和催化特性 1.1 酶的概念 生物细胞产生的具有催化功能的蛋白质 80年代 T.Cech and S.Altman L19RNA 活细胞产生的具有催化活性和高度专一性的特殊生物大分子，包括蛋白质和核酸。 依据 p94 1.2 催化剂的催化特点 共 性 用量少，催化效率高 2. 反应前后本身不发生改变 3.不改变反应的平衡点 特 性 催化效率更高 酶作用具有高度专一性 酶易失活 酶的催化活性可被调节 有些酶的催化活性与辅助因子有关 1.2 酶的催化特点 2.酶的组成和结构特点 2.1 酶的组成： 单纯酶 结合酶/复合酶