第五章 蛋白质合成PPT.ppt

真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 （四）真核生物延长过程 三、肽链合成的终止 终止密码的辨认 肽链的释放 mRNA与核蛋白体的分离 核蛋白体大、小亚基的分离 终止相关的蛋白因子称为终止因子(释放因子) (release factor, RF) 识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 诱导转肽酶改变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能: 原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物释放因子：eRF 释放因子发挥作用需要GTP 释放因子的种类: 原核肽链合成终止过程 核蛋白体沿mRNA链滑动，不断使多肽链延长，直到终止信号进入受位。 1．识别：RF识别终止密码，进入核蛋白体的A位。? 2．水解：RF使转肽酶变为酯酶活性，多肽链与tRNA之间的酯键被水解，多肽链释放。? 3．解离：通过水解GTP，使核蛋白体与mRNA分离，tRNA、RF脱落，核蛋白体解离为大、小亚基。 U A G 5 3 RF COO- IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 起始过程消耗1个GTP。 起始:生成起始复合物 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP 延伸:重复进位、成肽、转位 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 进位和转位各消耗一分子GTP U A G 5 3 RF COO- 终止:多肽链脱落、大小亚基解聚 终止过程消耗1个GTP。 　 　　　原核生物蛋白质合成的能量计算 氨基酸活化：2个~P ATP 起始： 1个 GTP 延长： 2个 GTP 终止： 1个 GTP 结论：每合成一个肽键至少消耗4个~P。 多聚核蛋白体 （polysome) 一个mRNA分子可同时有多个核蛋白体在进行同一种蛋白质的合成，这种mRNA和多个核蛋白体的聚合物称为多聚核蛋白体。 1 原核生物与真核生物翻译过程的区别 原核生物 真核生物 起始阶段 延伸阶段 终止阶段 三种起始因子参与；需GTP、Mg 2+ ；起始RNA携带的蛋氨酸需甲酰化；形成70S起始复合物 十余种起始因子参与；除需GTP、Mg 2+ 外,还需ATP；起始RNA携带的蛋氨酸不需甲酰化；形成80S起始复合物 延伸因子EF-T(Tu、Ts)及EFG促进“进位”与“移位” 延伸因子eEF-1及eEF-2促进“进位”与“移位” 需要三种释放因子 需要一种释放因子 蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation 第 三 节 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 主要包括 肽链一级结构的修饰 高级结构修饰 一、一级结构的修饰 （一）肽链N端的修饰 去除N端的甲酰基或去除N端蛋氨酸 （二）氨基酸的共价修饰: 羟基化、磷酸化、糖基化、乙酰化、甲基化 （三）多肽链的水解修饰： 如胰岛素的翻译后加工 (四) 二硫键的形成: 如胱氨酸的生成 （一）肽链N端的修饰： N端甲酰蛋氨酸，必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。 ① 去甲酰化： 甲酰化酶 甲酰蛋氨酸-肽 甲酸 + 蛋氨酸-肽 ? ② 去蛋氨酰基： 蛋氨酸氨基肽酶 蛋氨酰-肽 蛋氨酸 + 肽 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E 　 　　　 小结*: 氨基酸的活化形式：氨基酰－tRNA 催化的酶：氨基酰-tRNA合成酶 氨基酸活化的部位：羧基 供能物质：ATP 氨基酸活化耗能：2个~P 二、核蛋白体循环 （一）起始阶段： 大、小亚基 形成起始复合物 mRNA 起始tRNA （二）