第五章 酶非水相催化PPT.pptx

第五章 酶的非水相催化;非水酶学的提出;;对非水介质中酶催化的研究过程;突破性发现;概念：酶在非水介质中进行的催化作用称酶非水相催化 类型： 1、有机介质中的酶催化 是指酶在含有一定量水的有机溶剂中进行的催化反应； 适用于底物和产物两者或其中之一为疏水性物质的酶催化作用； 酶在有机介质中由于能够基本保持其完整的结构和活性中心的空间构象，所以能发挥其催化功能 ;2、气相介质中的酶催化;3、超临界流体中的酶催化;常用的超临界流体有：CO2, H2O, SO2 C2H4, C2H6 C3H8 C4H10 等。 超临界介质中酶催化体系的优点/缺点 脂溶性反应物和产物可溶于超临界C02，而酶作为蛋白质不溶解，有利于分离； 产物回收时，不需要处理大量的稀水溶液； 与有机溶剂体系相比，CO2无毒、不燃烧、无有机溶剂残留问题； CO2超临界体系有气体的一系列物理特征，使底物向酶的传质速度加快而使反应速度提高 简化产物的分离 已对10多种酶反应进行了研究，主要是酯化反应、酯水解反应和氧化反应。反应条件温和，反应温度低于50℃ ;4、离子液介质中的酶催化 酶在离子液中进行的催化作用 离子液是由有机阳离子与有机（无机）阴离子构成的、在室温条件下呈液态的低熔点盐类，具有挥发性低、稳定性好的特点 酶在离子液中催化作用的优点：具有良好的活性和稳定性、区域选择性、立体选择性、键选择性 阳离子主要是咪唑阳离子和吡啶阳离子 阴离子主要是氟硼酸根（BF4）、氟磷酸根等 ;酶非水相催化特点： 酶的热稳定性显著提高 非极性底物或产物的溶解度增加 水解酶可在非水介质中催化水解反应的逆反应（使某些反应的热力学平衡向合成的方向移动，例如酯键和肽键的形成） 酶的立体选择性和对底物特异性发生改变 酶不溶于有机溶剂，易于回收利用 降低反应后分离过程的能耗，回收产物比水容易 氨基酸侧链一般不需要保护 避免长期反应时微生物引起的污染，抑制水参与的不利反应 固定化酶方法简单，在非水系统中酶不易脱离吸附的表面 ;酶非水相催化意义： 改变了有关酶催化的传统观念 发展了酶学的理论体系—— 研究酶在非水介质中的结构与功能、作用机制、酶催化动力学等——非水酶学理论体系 扩展了酶的应用领域 在多肽、酯类合成，甾体转化，功能高分子合成，手性药物的拆分等方面取得显著成果 ; 5.1 酶非水相催化的概念、类型、特点、意义;1、微水介质体系； 2、与水溶性有机溶剂组成的均一体系； 3、与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系； 4、正胶束体系； 5、反胶束体系。;;（2）与水溶性有机溶剂组成的均一体系 由水和极性较大的有机溶剂互相混溶组成的反应体系，含量均比较大； 酶和底物都以溶解状态存在于体系中； 由于极性大的有机溶剂对一般酶的催化活性影响较大，能在该反应体系中进行催化反应的酶较少。 辣根过氧化酶（HRP）应用： 催化酚类或芳香胺类聚合成聚酚或聚胺类物，在环保黏合剂、发光聚合物材料中有重要作用。 ;（3）与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系 由水和疏水性强的有机溶剂组成的两相或多相体系； 游离酶、亲水性底物或者产物溶解于水相；疏水性底物或者产物溶解于有机溶剂相；固定化酶在两相界面； 催化反应在两相的界面进行； 适用于底物和产物两者或者其中一种是属于疏水化合物的催化反应。 ;（4）胶束体系 是在大量水溶液中含有少量与水不相混溶的有机溶剂，加入表面活性剂之后形成的水包油的微小液滴。 极性端朝外；非极性端朝内，有机溶剂包裹在液滴内部，形成一个非极性的核心； 酶在水溶液中，疏水底物或产物在胶束内，反应在胶束界面进行。 ;（5）反胶束体系 是在大量与水不相混溶的有机溶剂中含有少量的水，加入表面活性剂之后形成的油包水的微小液滴。 1997年首次报道酶在反相胶束中具有活性(已发现40多种酶)； 极性端朝内；非极性端朝外，水溶液包裹在液滴内部； 酶在反胶束内，稳定性好。 反胶束与生物膜有相似之处，适于研究生物膜表面酶的结构、催化特性、动力学特性。 ;; 如用十六烷基三甲基溴化铵，卵磷脂，形成“反胶束”包围酶分子，已开发出各种表活剂及助表活剂（如丁醇、已醇、辛醇）形成“反胶束”。 ; 反胶束体系能够较好地模拟酶的天然环境，大多数酶在此系统中能够保持催化活性和稳定性，甚至表现出“超活性”（super activity）。 ; 5.1 酶非水相催化的概念、类型、特点、意义;5.2.2 有机介质中酶的特性;;;在低水有机溶剂体系中，酶的稳定性与含水量密切相关；一般在低于临界含水量范围内，酶很稳定；含水量超出临界含水量后酶稳定性随含水量的增加而急剧下降。;热力学稳定性;③ PH特性 酶在有机介质中催化反应的最适pH通常与酶在水溶液中反应的最适pH接近或者相同。 酶蛋白中的可电离基团在有机溶剂中不