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胚 胎 工 程 胚胎工程 【复习回顾】 穿越放射冠 穿越透明带 穿越卵黄膜 原核形成 配子结合 顶体反应 透明带反应(第一道屏障) 卵黄膜封闭作用(第二道屏障) 雄原核形成雌原核形成 雌雄原核融合形成合子(受精卵) 受精 胚胎发育 受精卵 卵裂 桑椹胚 囊胚(内含囊胚腔) 原肠胚(内含原肠腔) 胎儿形成 (开始分化) 胚胎移植技术 胚胎分割技术 人工授精和胚胎体外培养 胚胎干细胞核移殖技术 胚 胎 工 程 二、胚胎工程的实验技术 (一)、人工授精和胚胎体外培养 胚 胎 工 程 二、胚胎工程的实验技术 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念:采取雌性动物的 和雄性动物的 ,使其在 中受精 注:发育的主要场所是母体。 卵细胞 精子 试管 卵细胞的获取 精子的获取 人工授精 胚 胎 工 程 1、人工授精 a.收集精子的方法有: 假阴道法 手握法 电刺激法 A、精子的获取 胚 胎 工 程 b.获能处理 a)培养法:啮齿动物、家兔和猪 b)化学诱导法:牛、羊 将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导,使精子获能。 将取自附睾的精子,放入人工配制的获能液中培养一段时间。 胚 胎 工 程 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵细胞的采集: 最常用的方法是卵巢经过 处理,具体做法是给供体注射 ,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 超数排卵 促性腺激素 输卵管或子宫 胚 胎 工 程 大家畜或大型动物,如牛卵细胞的采集: 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞. 也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出,在体外进行人工培养,使其成熟。 卵巢 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 牛卵巢 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 CO2培养箱内进行培养 如何使雌性动物排出更多的卵子 促性腺激素处理 对于大家畜或大型动物如何采集卵子 屠宰场、 超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜(活体) 采集的卵子是否马上可以受精 初级卵母细胞,体外培养至MII中期 胚 胎 工 程 C、人工授精 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 检查受精状况和受精卵的发育能力 1982年世界首例试管牛犊问世 胚 胎 工 程 试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 采集良种母牛的卵母细胞 采集良种公牛精子 卵母细胞的体外培养 精子体外获能 体外受精 早期胚胎 (胚胎移植) 受体牛 子代良种牛 “试管牛”培育流程图 (超数排卵) (早期胚胎培养) 试管动物的生殖 方式为__ __ __ __。 有性生殖 胚 胎 工 程 转基因试管牛 我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生 胚 胎 工 程 试管婴儿 1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。 胚 胎 工 程 胚 胎 工 程 1988年3月10日我国首例试管婴儿 胚 胎 工 程 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 概念:是应用人工创造条件,对获取的 进行体外培养。 培养液成分: 早期胚胎 水、无机盐、有机盐、维生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等 胚 胎 工 程 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿:8个或16个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 * * 由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同,进行胚胎体外培养时必须配制一系列含有不同成分的培养液用以培养不同发育时期的胚胎。 * * 由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同,进行胚胎体外培养时必须配制一系列含有不同成分的培养液用以培养不同发育时期的胚胎。
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