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基因工程的概念: 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。 第一节 DNA重组技术的基本工具 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 重组DNA 导入 形成 DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) 基因转移工具(“分子运输车”) 基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具: 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 1、作用——限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 磷酸二酯键 即脱氧核糖、磷酸之间的连接 A T G G C A T C T T C G A A 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,例如,EcoRΙ、SmaΙ,也有少数有4、5或8个核苷酸组成。 G A A T T C C T T A A G 中轴线 C T T A A G A A T T C G 大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,SmaI识别CCCGGG序列: C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C 黏性末端 平末端 原核生物很容易受到自然界中外源DNA的入侵, 但是长期的进化过程中,这些原核生物却没有因为 外源DNA的入侵而灭绝。 根据我们刚刚掌握的知识,你能推测这其中的 原因吗? 原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉,使之 失效,以保证自身的安全,但是不会切割自身的DNA, 这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。 2、 DNA连接酶——“分子缝合针” 作用——把两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来。 G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 G P A P 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否一样呢? E.coliDNA连接酶:连接黏性末端 T4DNA连接酶:连接黏性末端和平末端 DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA链 双链 单链 连接部位 两DNA片段之间的磷酸二酯键 将游离的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接起来。 寻根问底: DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,还得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 质粒 拟核 大肠杆菌细胞 作为载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 有标记基因 对受体细胞无害 随堂练习: 1、关于限制酶的说法中,正确的是( ) A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中 答案:C 2. (多选)有关基因工程的叙述中,错误的是 A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状,培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 答案:BD 3.下列四条DNA分子,彼此间具有粘性末端的一组是 A.①② B.②③ C.③④ D.②④ 答案:D 纪录片下载 纪录片 / 纪录片下载 纪录片 爷那次到河南办差是肩负重任/考察灾情/所以回到京城之后/又是拟奏折/又是面圣汇报情况/又是与官员们研究弹劾贪官污吏の事情/忙得好几天都没什么时间回府里/所以只能是派小太监向水清转达咯他の关心和问候/又吩咐小太监问咯她和福宜の情况再禀报给他/小太监那几次传话の时候/都赶上年夫人都别在场/而水清也没什么将他传话の事情告诉给她の娘亲/所以年夫人根本就别晓得王爷那些天没什么回府里来/于是心中暗自盘算:爷第壹天歇在福晋那里/那第二天、第三天/就是轮也应该轮到她闺女咯/可是……年夫人天天盼着王爷能够来到怡然居看望水清/看望小小格/可是天天都是在失望
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