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IL-27转染人食管鳞癌细胞抗肿瘤 效应及其机理研究 河北医科大学第四医院 科研中心 河北省肿瘤研究所 刘丽华 我国是食管癌的高发区，世界上约50%的食管癌发生在中国，到医院就诊的患者中95%为中晚期。 尽管通过手术、化疗和放疗使食管癌的生存率得到很大提高，平均5年生存率仍为10%。 近年来，肿瘤生物治疗受到了人们的关注，并逐渐成为肿瘤的第四种治疗方法。 引 言 IL-12 family members：IL-12, IL-23 and IL-27 is primarily produced from activated antigen presenting cells (monocytes, macrophages and dendritic cells) whereas IL-35 is produced by regulatory T cells. These cytokines are all composed of two subunits, a helical subunit (IL-12p35、IL-23p19、IL-27p28、IL-35p35) and a soluble cytokine receptor-like subunit (IL-12p40、IL-23p40、IL-27EBI3、 IL-35EBI3). 引言 本研究旨在探讨IL-27基因转染对人食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应及其对免疫功能的影响，探讨其抗肿瘤作用机制。 目 的 细胞转染 逆转录 病毒载体 (LXSN/IL-27) Ψ2 病毒 PA317 polybrene 病毒 polybrene Eca109 Eca109/ IL-27 Ψ2/ IL-27 PA317/ IL-27 G418 G418 Eca109/ LXSN G418 Lipofectamine …… 方法 Eca109/IL-27 Eca109/LXSN Eca109细胞 1×107个细胞/只 皮下接种 腹腔接种 成瘤性、生存期 肿瘤体积 建立动物模型 （mm3）＝长径×短径2×1/2 方法 肿瘤组织 脾 RNA RT-PCR T-bet, IL-12Rb2, TNF-a, IL-1b and IL-6 免疫组化 NK ELISA IFN-g NK杀伤活性 LDH IL-27对免疫调节作用研究 方法 Eca109/IL-27细胞的培养上清中检测到IL-27，其含量为153.73±7.0pg/ml。而在Eca109/LXSN细胞和野生型Eca109细胞的培养上清中未检出IL-27。 结果 蛋白水平鉴定转染成功 Fig.1 Expression of IL-27 EBI3 and p28 gene in different cells dected by RT-PCR. M: DNA marker; A:Eca109/IL-27 cells; B: Eca109/LXSN cells; C: Eca109 cells. 基因水平鉴定转染成功 EBI3 (706bp) b-actin 500bp M A B C M A B C P28 (231bp) 500bp b-actin 结果 IL-27基因表达 * * Fig.2 Tumor’s growth in nude mice inoculated subcutaneously with different tumor cells. * vs Eca109 and Eca109/LXSN groups respectively, P0.01 IL-27对肿瘤生长的影响 生存期 56±4day 54±3day 97±4day * 结果 Fig.3 Infiltration of NK cells in tumor tissues from nude mice after inoculation with different cells. * vs Eca109 and Eca109/LXSN groups respectively, P0.05  Eca109/IL-27 Eca109/LXSN Eca109 12.6±1.2% * 8.4±0.9% 7.8±0.7% IL-27对移植瘤组织NK细胞浸润数量的影响 结果 ( * ( * * Fig.5 Cytotoxic