二轮复习课本上不常提及实验-DNA粗提取和鉴定.pptx

DNA的粗提取与鉴定 ;实验一DNA粗提取与鉴定;学习目标 知识目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法，能利用DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。;1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同， 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂； 5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细胞膜，同时也能使蛋白质变性； 6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 7、甲基绿能使DNA染成绿色;;两种材料的DNA粗提取与鉴定过程;鸡血细胞;鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图;2mol/L;5、过滤→取纱布上的滤物;7、加冷酒精使DNA析出（纯化）;DNA的鉴定;DNA的粗提取与鉴定;考点提示： （1)鸡血能用猪血代替吗？为什么？ 不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。  （2）鸡血中为何要加柠檬酸钠？为何要弃去鸡血细胞的上清液？ 防止血液凝固；因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。  （3）胀破细胞的方法？能用生理盐水吗？ 向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破；不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。  （4）该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯？为什么？ 最好用塑料烧杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA。  （5）前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？为什么？ 第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液；第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液；第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。  （6）若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么？ 第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破；第二次加蒸馏水过多或过少；第一次过滤用了多层纱布；第二次过滤用了一层纱布。 ;（7）两次加入蒸馏水的目的分别是什么？ 第一次是为了使血细胞吸水胀破；第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。  （8）实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌？ 防止DNA分子受到损伤。  （9）两次析出DNA的方法分别是什么？原理分别是什么？ 第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。  （10)三次溶解DNA的液体分别是什么？原理分别是什么？ 第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L（或2 mol/L）的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0。015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。  （11)鉴定DNA时为何要用两支试管？其现象分别是什么？ 其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。 ;实验原理;; ;二、方法步骤 1．使用尿糖试纸测定尿糖浓度 (1)将5个分别装有水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”的滴瓶和5条葡萄糖试纸分别对应做好标记，并在记录本上设计好记录表格。 (2)分别用滴管从5个滴瓶中吸取溶液，在对应的葡萄糖试纸上各滴加2滴。 (3)观察试纸的颜色变化并与标准比色卡对比，判断出“尿糖”的含量。 (4)将实验结果记在记录表中。 2．也可利用斐林试剂检测尿糖;实验三 探究水族箱(或鱼缸)中群落的演替;1．如果生态缸中腐生的微生物数量太少，最先出现营养危机;2．许多同学都尝试设计制作生态缸，下面所列举的在设计生